背景:卵巢癌发病隐匿,死亡率高,严重威胁女性生命。广泛转移和化疗耐药是导致卵巢癌复发和死亡的主要原因,深入研究卵巢癌的发病机制,探索有效干预策略,是提高卵巢癌生存率的关键。小分子多肽,尤其是内源性肽具有分子量小、靶向性强、毒性低等特点,在抗肿瘤药物研究领域具广阔的应用前景。目的:分析高级别浆液性卵巢癌组织与正常卵巢上皮组织差异表达的多肽,并初步探索这些多肽发挥作用的机制。方法:以3例高级别浆液性卵巢癌组织样本为实验组,3例正常卵巢上皮组织样本为对照组,采用定量液相色谱串联质谱法(liquid chromatograph/mass spectrometer,LC/MS)检测两组之间内源性多肽的表达情况,筛选并分析差异表达的多肽。根据表达丰度高、组间差异大的原则选择2种在高级别浆液性卵巢癌组织中降低最多的多肽(源自PAPD7的肽,peptide 1 derived from PAPD7,缩写为P1DP;源自S38AA的肽,peptide 1 derived from S38AA,缩写为P1DS),通过CCK8、Transwell侵袭、迁移实验验证其功能。通过CCK8细胞毒性检测实验探索P1DS对OVCAR3细胞紫杉醇和顺铂敏感性的影响及在肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)存在下P1DS对OVCAR3细胞紫杉醇和顺铂敏感性的影响。通过pull down联合质谱技术寻找P1DS可能直接结合的蛋白。通过高通量测序技术探索P1DS的可能靶标。结果:该研究共检测到来自1805种前体蛋白的3992个肽段,其中浆液性卵巢癌组织样本中共检测到3920±36条多肽,正常卵巢上皮组织样本中共检测到3805±76条多肽。功能学实验表明,P1DS可明显抑制卵巢癌细胞的侵袭、迁移能力,而P1DP对卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力均无影响。P1DS并不影响OVCAR3细胞对紫杉醇和顺铂的敏感性,但是P1DS可以显著逆转TAM对OVCAR3细胞耐药性的促进作用。质谱分析结果显示,biotin-P1DS pull down洗脱液中可特异性检测出39种蛋白,其中丰度较高的CAH2、RAP1A、IGHG1、EF1A1、KLHL7、PROF1等蛋白与肿瘤迁移相关。高通量测序结果表明,加入P1DS后,15个基因表达水平显著下调,18个基因表达水平显著上调(q<0.01,差异倍数≥2),进一步荧光实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)验证发现,P1DS处理组SULT1A3基因表达显著下调,推测其可能是P1DS一个重要的作用靶标。结论:本研究分析了卵巢癌中的多肽谱,选择2条多肽进行初步的功能研究。结果发现多肽P1DS具有抑制卵巢癌细胞侵袭、迁移的特性,且P1DS可逆转肿瘤相关巨噬细胞介导的OVCAR3细胞耐药。根据pull down质谱分析结果初步推测P1DS可能通过结合某些与肿瘤迁移相关的蛋白来发挥作用。结合高通量测序及RT-q PCR结果,初步推测P1DS可能通过靶向SULT1A3抑制卵巢癌的侵袭和迁移。