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为了利用纤维素降解菌提高食用菌菌渣发酵效果,促进菌渣循环利用,本文从菌渣中采集样品进行微生物分离培养,并通过测定纤维素酶活性,开展了菌渣纤维素高效降解菌的筛选、复合菌系构建及应用研究,并得到以下主要结果:(1)从菌渣中采集样品分离培养,通过刚果红透明圈实验、滤纸条降解试验和纤维素酶活力测定,筛选得到4株纤维素降解能力强的细菌(FB7、CB1、BC11、BC12),经16S r DNA序列鉴定,FB7、CB1为芽孢杆菌属的2个种、BC12属于丛毛单胞菌属(Comamonas sp.)、BC11为白色链霉菌(Streptomyces albus),其中FB7液体培养4 d时,FPA、CMCase、C1、β-Gase的酶活性与其他菌株相比最高,分别为22.81 U·g-1、314.5 U·g-1、2.7 U·g-1、188.09 U·g-1,为筛选到的最优菌株。(2)FB7与BC11、BC12、CB1随机组合,构建11种复合菌剂,经滤纸条降解试验和纤维素酶活性测定,复合菌(CB1+BC11+FB7)在第6 d时将滤纸降解成糊状,FPA酶在第3-4 d达到最大值31.98 U·g-1,培养第5 d CMCase、C1、β-Gase酶的活性为133.61 U·g-1、2.31 U·g-1、217.21U·g1。(3)菌渣堆肥中加入复合菌(处理B,CB1+BC11+FB7)和有机发酵菌曲(处理A)堆体的温度上升较快。发酵过程中,加入菌剂的处理A、B的堆体温度高于对照。FPA酶活性在整个发酵过程中均高于CK,说明接种复合菌剂能使堆肥中纤维素酶活性显著提高。对双孢蘑菇产量统计,处理A、B总产量与对照相比略有提高,但差异不显著。(4)利用高通量方法对发酵过程中细菌多样性进行分析发现加入微生物菌剂后可以增加菌渣发酵过程中物种丰富度,改变群落结构组成。处理A、B的香浓指数(Shannon index)大于对照,表明物种多样性增加。Proteobacteria(变形菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)、Acidobacteria(酸杆菌门)、Verrucomicrobia(疣微菌门)、Planctomycetes(浮霉菌门)以及Actinobacteria(放线菌门)是3个处理发酵过程中的主要细菌门类,但各类微生物在3个处理中所占比例完全不同。其中,处理A的优势菌是Candidatus_Nitrososphaera、Bacillus sp.,处理B和对照的优势菌分别为Pedobacter、Acinetobacter和Comamonas、Candidatus_Xiphinematobacter。