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研究目的:
桃仁是活血化瘀要药,为常用中药,药理活性明确,临床疗效确切,已广泛应用于成方制剂中。由于桃仁的化学成分较复杂,目前国内外对其化学成分、药理作用的尝试性研究报道不少,但均不够深入和系统。缺乏桃仁有效的质量评价体系,系统研究有效成分不足,影响了深入开发桃仁的利用。研究基础在桃仁化学成分部分相对薄弱,其指标性成分需探寻并能阐明药效,为桃仁的质量研究建立更科学、客观的评价体系,特别是能够阐明桃仁活血化瘀的物质基础。桃仁中的脂溶性成分约占桃仁干质量的50%,蛋白质类成分约占25%,多糖约占1.83%,桃仁中含有复杂的脂肪酸类成分,主要可分为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸4种,其中不饱和脂肪酸(油酸和亚油酸)的量为85%~93%。因此,本文建立桃仁中脂肪酸类成分的提取、纯化方法,结合药效验证,阐明桃仁活血化瘀作用的物质基础,进而建立桃仁质量评价方法。
研究方法:
1显微鉴别通过临时制片、永久制片观察药材粉末组织细胞及内含物等显微特征;绘图、显微测微及显微照相。
2桃仁有效部位的筛选采用系统溶剂法,按溶剂极性不同进行分部位提取;根据桃仁主要的活血化瘀作用,进行药效学筛选、优化及跟踪分离,确定具有药理活性的部位。桃仁化学成分不同极性分成(石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、水)部位,采用动物实验进行有效部位筛选,用GC-MS技术对桃仁有效部位进行分析研究确定有效部位化学成分及含量。
3桃仁有效部位化学成分的提取、分离纯化实验中就桃仁有效部位,采用加热回流法提取、系统溶剂法按极性由小到大的顺序分离、柱色谱分离纯化方法,采用TLC、紫外分光度色谱法分析鉴定桃仁活血化瘀作用的化学成分。
4桃仁活血化瘀药效验证实验的研究对桃仁有效部位分离纯化的组分,结合药效验证实验,最终确定桃仁活血化瘀药效物质基础。
5统计学分析各组试验数据均以均数±标准差表示,计量资料用t检验、计数资料用卡方检验进行统计分析。
研究成果:
通过文献研究对桃仁的化学成分和药理作用有了系统的了解;通过桃仁显微研究确定桃仁药材的显微鉴别特征;建立血瘀症动物模型,结合药效学筛选桃仁活血化瘀的有效部位,并确定有效部位化学成分及含量;优化桃仁有效成分或有效组分提取、分离纯化工艺;选取桃仁活血化瘀有效组分进行药效验证,最终确定桃仁活血化瘀的物质基础和最佳适应症,以提高桃仁活血化瘀的临床疗效,建立桃仁质量评价体系。
结论:
通过本课题的研究,确定桃仁中脂肪酸类为有效组分,表明了桃仁活血祛瘀的物质基础,为桃仁单味药材和复方制剂的质量评价奠定基础。