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本课题拟制备两亲型嵌段共聚物聚乙二醇-聚谷氨酸苄酯(PEG-PBLG)纳米载药微球,并装载难溶性闭环羟基喜树碱。通过稳定HCPT在血浆中的闭环内酯结构、延长其体内半衰期,并具有缓释和肿瘤靶向输送等优点,进行其体内外治疗口腔鳞癌作用研究以验证其抑瘤效果。方法和结果:
第一部分载闭环HCPT的PEG-PBLG纳米微球的制备和检测方法:首先采用阴离子聚合法制备PEG-PBLG两亲型嵌段共聚物,再以透析法制备载闭环HCPT的PEG-PBLG纳米微球。经紫外分光光度仪测定样品吸光度后计算包封率和载药率。扫描、透射电镜检测纳米微球的结构表征:包括纳米微球的大小、形态。结果:成功制备HCPT/PEG-PBLG纳米微球,包封率:56.8%;载药率:7.5%。HCPT/PEG-PBLG纳米微球经透射、扫描电镜显示球形核-壳型结构,中心为疏水性PBLG内核,外周为亲水性PEG外壳。微球直径约300nm,外壳厚度约30nm。
第二部分HCPT/PEG-PBLG纳米微球对Tca8113细胞体外抑制实验方法:舌鳞癌Tca8113细胞复苏和培养,传代至指数生长期进行实验。
第三部分HCPT/PEG-PBLG纳米微球治疗
金黄地鼠颊囊癌实验研究方法:二甲基苯并蒽(DMBA)诱导建立金黄地鼠颊囊鳞癌动物模型,12周病理确诊后行干预实验:生理盐水(NS)、PEG-PBLG对照组和HCPT、HCPT/PEG-PBLG治疗组药物(3mg/kg)腹腔注射,每天一次,连续5天。