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目的研究蛋白酶抑制剂MG132与DDP联合用药对卵巢癌细胞株Caov-3增殖和凋亡的影响,同时检测细胞内NF-κB、caspase-3以及VEGF的表达情况,了解MG132的体外抗卵巢癌作用及其可能的作用机制,为蛋白酶抑制剂在卵巢癌治疗方面提供重要的实验室基础和理论依据。方法1、采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,检测24h、36h、48h Caov-3细胞的生长抑制率。阴性对照组:加1640培养基MG132组:终浓度为1.25μM、2.5μM、5μM、10μM、20μM DDP组:终浓度为1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml联合用药组:5μM的MG132预处理2h,DDP终浓度同DDP单独用药组2、采用流式细胞仪检测24h Caov-3细胞的凋亡率。阴性对照组:加1640培养基DDP组:终浓度为2.5μg/ml联合用药组:DDP终浓度为2.5μg/ml,MG132预处理2h的浓度分别为2.5μM、5μM、10μM3、免疫组化SP法测定药物作用24h后Caov-3细胞中NF-κB、caspase-3以及VEGF的表达情况,实验分组与流式细胞检测细胞凋亡分组相同。结果:1.MG132浓度为1.25μM、2.5μM、5μM、10μM和20μM时,作用24h、36h、48h均明显抑制Caov-3细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性。同一时间内,随着MG132浓度升高,Caov-3的CGIR增高,不同浓度组间的CGIR差异有统计学意义(P<0.01)。浓度相同时,随着MG132作用时间的延长,Caov-3的CGIR增高,不同时间组间的CGIR差异有统计学意义(P<0.01)。24h、36h、48h,Caov-3的IC50分别为:5.87μM、3.75μM、2.41μM。2.DDP联合应用MG132时能显著提高DDP对Caov-3细胞的杀伤能力。单用DDP 1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml和10μg/ml分别作用24h、36h、48h时的IC50为6.21μg/ml、3.41μg/ml、2.24μg/ml。用5μM的MG132预处理2h后,DDP的IC50改变为3.35μg/ml、2.14μg/ml、1.45μg/ml。联合应用MG132、DDP与单独使用DDP对卵巢癌细胞的生长抑制率相比,差异有显著性(P<0. 01)。3.采用流式细胞仪检测Caov-3细胞的凋亡率, 2.5μg/ml的DDP作用24h小时后,细胞凋亡率为10.78%,用MG132预处理2h再联合DDP用药后细胞凋亡增加更明显,细胞凋亡率在预处理MG132浓度为2.5μM、5μM、10μM时分别为17.21%、28.08%、43.50%,显著高于阴性对照组、DDP组,联合用药组各组间两两比较差异有显著性(P<0.01)。4.免疫组化SP法显示MG132、DDP联合用药作用24h小时后Caov-3细胞中NF-κB、VEGF的表达下调,caspase-3表达增加。与对照组、DDP组比较差异有显著性(P<0.01),联合用药组各组间两两比较差异有显著性(P<0.01)。结论:1.MG132能有效抑制卵巢癌细胞Caov-3增殖。2.MG132能诱导卵巢癌细胞Caov-3凋亡,其部分作用机制可能是通过抑制NF-κB的活化并促进caspase-3的表达来抑制肿瘤生长和诱导肿瘤细胞凋亡。3.MG132能下调VEGF的表达,可能与抑制NF-κB信号传导通路有关。4.MG132能够增强DDP的化疗作用,提高卵巢癌治疗效果。