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目的:通过研究类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中长链非编码RNA(Lnc RNA)-IFNG-AS1表达变化,分析lnc-IFNG-AS1与IFN-γ、T-bet以及RA临床实验室诊断指标的相关性,为进一步研究RA疾病的发病机制提供新的思路。方法:1、通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测RA患者、骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者和健康志愿者PBMCs中lnc-IFNG-AS1、IFNG mRNA的相对表达水平,分析lnc-IFNG-AS1和IFNG mRNA表达水平的相关性。2、通过q RT-PCR检测RA患者、OA患者和健康志愿者PBMCs中T-bet mRNA相对表达水平,分析RA患者PBMCs中T-bet mRNA与lnc-IFNG-AS1表达水平的相关性。3、通过免疫磁珠法分选健康志愿者外周血中CD4+T细胞,转染针对T-bet分子的si RNA,培养24h后,q RT-PCR检测T-bet mRNA、lnc-IFNG-AS1的相对表达水平的变化,分析T-bet分子对CD4+T细胞中lnc-IFNG-AS1的调控作用。4、分别分析RA患者PBMCs中T-bet mRNA、lnc-IFNG-AS1、IFNG mRNA相对表达水平与其外周血中类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)水平之间的相关性。将RA患者分成抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibody,anti-CCP-Ab)阳性以及阴性组,比较两组之间T-bet mRNA、lnc-IFNG-AS1、IFNG mRNA相对表达水平。结果:1、与健康志愿者相比,RA患者的PBMCs中lnc-IFNG-AS1相对表达量显著增高(0.35±0.25vs0.13±0.10,P<0.001),IFNG mRNA相对表达量显著增高(0.93±0.56vs0.66±0.42,P<0.05),OA患者的PBMCs中lnc-IFNG-AS1相对表达量明显高于健康志愿者(0.25±0.09vs0.13±0.10,P<0.01),而IFNG mRNA相对表达量与健康志愿者相比无明显变化(0.73±0.48vs0.66±0.42,P>0.05);RA患者的PBMCs中lnc-IFNG-AS1与IFNG mRNA的相对表达量呈明显正相关(r=0.5467,P=0.0015),在OA患者PBMCs中两者无明显相关性,p>0.05。通过受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC curve)分析RA患者PBMCs中lnc-IFNG-AS1相对表达量,ROC曲线下面积(area under the roc curve,AUCR0C)为0.815,标准误(standard error,SE)为0.053,P<0.01,95%置信区间(confidence interval,CI)为0.711~0.919,最佳临界值(best cutoff value)为0.102。2、与健康志愿者相比,RA患者的PBMCs中T-bet mRNA的相对表达量显著增高(0.77±0.45vs0.49±0.22,P<0.01),而OA患者的PBMCs中T-bet mRNA的相对表达量差异无统计学意义(0.66±0.32vs0.49±0.22,P>0.05);RA患者PBMCs中lnc-IFNG-AS1与T-bet mRNA的相对表达量呈显著正相关(r=0.6923,P<0.0001),而OA患者的PBMCs中两者无明显相关性(r=0.0872,P>0.05)。3、与阴性对照(negative control,NC)组相比,分别转染25n M、50n M、100n M浓度的si RNA-T-bet,培养24小时后,健康志愿者的CD4+T细胞中T-bet mRNA相对表达量显著降低(0.84±0.14vs1.26±0.17,0.68±0.10vs 1.26±0.17,0.37±0.13vs1.26±0.17,P均<0.001),lnc-IFNG-AS1相对表达量显著降低(1.17±0.27vs1.99±0.32,0.97±0.21vs1.99±0.32,0.40±0.15vs1.99±0.32,P均<0.001),lnc-IFNG-AS1相对表达量对si RNA-T-bet表现出浓度依赖效应。4、RA患者PBMCs中lnc-IFNG-AS1相对表达量与其外周血CRP水平(r=0.4751,p=0.0069)、ESR水平(r=0.3821,p=0.0309)、RF水平(r=0.5118,p=0.0106)呈明显正相关;血清anti-CCP-Ab阳性组的RA患者,其PBMCs中lnc-IFNG-AS1相对表达量显著高于阴性的RA患者(0.48±0.28vs0.21±0.14,P<0.05)。结论:1、与健康志愿者相比,RA患者体内lnc-IFNG-AS1、IFNG mRNA的相对表达量显著升高,两者呈明显正相关;同时患者外周血中lnc-IFNG-AS1的相对表达水平与RF、CRP、ESR水平存在明显正相关,提示lnc-IFNG-AS1能在一定程度上体现疾病的严重程度。2、RA患者PBMCs中的lnc-IFNG-AS1相对表达量的ROC曲线下面积(AUCR0C)为0.815,提示lnc-IFNG-AS1对RA的诊断具有潜在的临床价值。3、RA患者体内T-bet mRNA相对表达量明显升高,且与lnc-IFNG-AS1相对表达量呈明显正相关,体外干扰外周血CD4+T细胞中的T-bet mRNA水平后,lnc-IFNG-AS1的相对表达量明显下调,提示RA患者体内T-bet分子可调控lnc-IFNG-AS1的表达。