论文部分内容阅读
目的:通过研究OX40和OX40L分子在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞上的表达及其在SLE发病机制中的可能作用,调控OX40、OX40L在相应靶细胞上的表达和阻断OX40/OX40L通路从而减少炎症反应的发生,为治疗自身免疫疾病提供新的思路。方法:采用流式细胞仪检测技术对43例SLE患者和15例健康志愿者外周血淋巴细胞上OX40和OX40L的表达水平进行分析,同时,对SLE患者中的肾炎型与非肾炎型外周血淋巴细胞上OX40和OX40L的表达水平进行比较,并对10例SLE患者进行治疗前后OX40和OX40L表达水平的比较。测定OX40和OX40L表达水平的具体步骤为:(1)每个流式管加入50ul外周血,分别加入CD4-Tc、OX40-FITC和OX40L-PE, 4℃度反应时间20min;(2)同时设阴性对照管,对照管中加入CD4-Tc、IgG-FITC和IgG-PE或CD19-FITC、IgG-PE,4度反应20min;(3)加入溶血剂裂解红细胞直至液体变清;(4)再加磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤;(5)离心1800rpm,5min; (6)离心后,倒掉上清,加0.5ml PBS上流式细胞仪测表型。结果:OX40和OX40L在CD4+ T细胞上共表达。与正常对照组相比:(1)SLE患者外周血中,CD4+ T OX40+OX40L+细胞亚群数量增加;(2)CD8+ TOX40+OX40L+细胞亚群数量无变化; (3)OX40L+ B细胞增加;(4) OX40L+单核细胞增加;(5)OX40L在NK细胞上表达增强。在SLE患者中,肾炎型患者CD4+OX40+ T细胞增加且明显大于非肾炎型;此外,发现SLE患者治疗后OX40和OX40L表达均有不同程度下调。结论:SLE患者外周血T淋巴细胞、单核细胞、NK细胞上存在OX40和OX40L的异常表达,在肾炎型患者表达上调,治疗前后表达水平有显著变化。提示OX40/OX40L信号在T细胞与单核细胞、NK细胞的相互作用过程中可能有助于T细胞的持续活化,从而参与SLE的发生发展。