MxA蛋白是I型干扰素(INF-α/β)所诱导的蛋白,具有广泛的抗病毒活性(主要针对RNA病毒)。此蛋白产物的诱导动力学特征与细胞的抗病毒状态呈完全的平行,病毒感染时内源性干扰素明显升高,MxA可反映内源性干扰素的状态,从而间接反映病毒感染,因此MxA量的升降可作为病毒感染的一个特异的指标。在国外,该蛋白已经引起了广大研究者的关注,并进行了深入的探讨;在国内,近年来也逐渐引起学者的兴趣。随着MxA蛋白的深入研究,迫切需要制备对应抗体来开展该项研究工作,而且MxA作为病毒感染的特异性指标,抗MxA单克隆抗体制剂本身也具有开发利用的潜能,具有广阔的应用前景。尽管国外已有该蛋白的特异性多抗和单抗,但均未商品化,在国内并未曾有有关报道,因此我们有必要在国内制备对应的高特异性的多抗和单抗供广大研究工作者使用,并研制MxA快速检测试剂盒抢占中国市场,为广大医患服务。本研究在已获得该基因并重组入克隆载体的基础上,通过基因工程方法构建原核表达载体pET-32a(+)-MxA,并在工程菌BL21中获得高效表达,蛋白含量可达菌体总蛋白量的25%,以割胶纯化的纯度达90%以上的目的蛋白进行腹腔注射免疫小鼠并利用不同形式的MxA蛋白作为抗原对抗血清进行特异性分析,结果表明获得了特异性较高的抗血清;继而使用PEG4000利用细胞融合技术将该蛋白免疫的Balb/c小鼠的脾脏细胞与鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0细胞融合,经三轮单克隆后成功地获得了分泌该蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为杂交瘤细胞3C2,利用Western-blot、免疫细胞化学、免疫细胞荧光和免疫沉淀试验等各种免疫学方法检测其抗体的特异性和效价,并通过抗体纯化技术对大量制备的腹水进行浓缩和纯化,利用间接ELISA法对纯化蛋白进行效价评定,实验最终得到了高效而特异性强的抗MxA蛋白的单克隆抗体。所得结果不仅为MxA基因和MxA蛋白的理论研究提供免疫学实验材料,也为研制MxA快速检测试剂盒奠定了坚实的基础。