基于纤维载体的蛋白质印迹海藻酸钙复合水凝胶膜

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海藻酸盐是一种从褐藻中提取的天然有机物,粉末易溶于水,吸湿性较强。形成的溶液粘度大,溶液中加入多价阳离子会发生凝胶化作用。海藻酸钙(CaAlg)水凝胶具有制备简单,毒性低,生物相容性好及可降解等优点,且成膜条件温和,不需要添加任何有机溶剂,因此CaAlg水凝胶可以广泛应用在生物医学领域。除此之外,它的机械性能、传质过程以及分解属性都可以通过控制外部条件进行调节。本文以CaAlg水凝胶为研究对象,通过采用聚丙烯(PP)纤维支撑和聚-β-羟丁酸(PHB)纳米纤维接枝的方法,改善纯CaAlg水凝胶不稳定和机械性能差的缺点,并研究其在蛋白质分子印迹方面的应用。研究工作主要分为以下三个方面:纯CaAlg水凝胶作为表面印迹材料,以牛血清蛋白(BSA)为模板,制备了蛋白质分子印迹CaAlg凝胶膜,通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(FT-IR)、对杂化凝胶膜性能进行表征且研究了其溶胀性能和力学性能。讨论了凝胶膜片厚度、缓冲液种类、Tris-HCl作为缓冲液的pH值对凝胶膜释放和重吸附BSA的影响。研究结果表明,厚度为0.4mm的凝胶膜的印迹效果最好,CaAlg凝胶膜在PBS缓冲液中的印迹效果优于NaCI溶液和Tris-HCl缓冲液,但CaAlg膜在PBS缓冲液中不稳定,有过度溶胀导致膜片破裂的情况。中性的Tris-HCl缓冲液最适合海藻酸钙凝胶膜的印迹过程。分别以PP纤维和PHB纳米纤维作为支撑载体,分别制备了PP-s-CaAlg凝胶膜和PHB纳米纤维增强CaAlg凝胶膜,并通过扫描电镜(SEM)和红外光谱(FT-IR)对复合膜进行了表征,探究了纤维支撑后凝胶膜的溶胀性能和力学性能。在三种不同洗脱液中的释放实验和对BSA的重吸附实验结果表明,PP-s-CaAlg凝胶膜和PHB纳米纤维增强的CaAlg凝胶膜与纯CaAlg膜相比溶胀度有所降低,但印迹效果更稳定,对BSA的吸附量也有所升高,说明纤维增强的方法确实提高了CaAlg膜的稳定性和机械强度,对比在三种缓冲液中的数据可以看出,PP-s-CaAlg凝胶膜和PHB纳米纤维增强的CaAlg凝胶膜在PBS缓冲液中的释放量和重吸附量最高,且吸附量明显高于非印迹凝胶膜。
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