0.4mT工频磁场辐照对FL细胞与细胞骨架和爬行相关的信号蛋白的影响初探

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50Hz工频磁场作为环境中最为常见的极低频磁场之一,它对生物可能造成的影响是很多研究者关注的重点之一。我们已取得的前期的研究结果表明:0.4mT50Hz工频磁场的辐照细胞仅30min就能使细胞表面的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)发生聚集;同时引起人羊膜成纤维细胞(FL细胞)和中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL细胞)的细胞骨架发生重组;且PD153035(EGFR的特异性酪氨酸酶抑制剂)可以完全或部分抑制这些效应。此外,当EGFR被激活后,EGFR与细胞骨架的F-actin紧密结合,这与细胞骨架的重组与细胞的迁移能力有着紧密的联系,在微丝骨架的重组和细胞爬行过程中EGFR信号通路中的信号分子(fasci、vinculin、Arp2/3、MLC等)扮演重要的角色,提示磁场可能可以通过EGFR信号通路产生效应。为了进一步研究EGFR信号通路的各个信号分子在工频磁场辐照的作用下诱导细胞骨架重组从而影响细胞爬行机制中的作用机制,本文以人羊膜成纤维细胞(FL细胞)为研究对象,用蛋白质免疫印迹(Western Blotting),荧光免疫标记等方法研究0.4mT,50Hz工频磁场是否和如何通过EGFR信号通路来影响细胞微丝骨架重组和细胞爬行,以及此影响对相关信号分子的作用。实验结果发现:FL细胞经0.4mT,50Hz工频磁场辐照30分钟后,用蛋白质免疫印迹(Western Blotting)检测到胞内(1)F/G-actin的比例降低,即总F-actin含量减少,(2)与丝状伪足相关的信号蛋白fascin的含量增加,(3)与粘连斑相关的vinculin含量升高;(4)与片状伪足相关的Arp3含量上升,(5)与应力纤维结合的MLC含量下降,但游离的MLC含量上升,(6)同时抑制细胞膜上L-型Ca2+通道和EGFR酪氨酸激酶能使上述现象消失。本文的实验结果表明:工频磁场可能通过影响与细胞爬行相关的信号蛋白的水平,在EGFR信号通路的交互作用下,来影响细胞骨架的重组和细胞爬行的机制。
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