研究背景:颌面部相关治疗,如正畸中的功能矫治,可能引起颌骨位置的改变,从而改变口颌系统肌群的功能状况。肌细胞感觉和传导各种刺激信号,使细胞核的基因转录过程发生改变从而刺激肌肉特异基因的表达,调控肌纤维整合的一系列反应,而使细胞的结构以及细胞外与肌纤维有关的神经、血管等发生相应的结构-功能适应性改建,这也是各种相关治疗成功及稳定的一个关键因素。因此摸索合适的牵张及神经刺激,促进骨骼肌的分化改建,以适应新的颌位,对于功能矫治等治疗有重要意义。牵张力和神经刺激作用下的肌肉组织细胞应答机制也成为口腔正畸基础研究的热点之一。　　 肌细胞增强子2(MEF2)是多种调节肌肉特异性转录基因中一个重要的调节因子,MEF2可以激活多种肌肉相关基因的表达,这些基因的表达产物对于肌肉组织的分化、维持和再生等有重要作用。MEF2因C端转录活性区的特异性而有不同的分型,MEF2A是在骨骼肌中主要表达的亚型之一,对MEF2A表达的研究是对肌肉组织细胞应答机制研究的重要组成部分。　　 研究目的:本研究以小鼠成肌细胞株C2C12为研究对象,观察周期性牵张力及乙酰胆碱刺激,对C2C12细胞MEF2A mRNA和蛋白表达的影响,探讨其间可能存在的力学信号与刺激因素的关系。　　 研究方法:本研究第一部分建立C2C12细胞力学刺激模型,对C2C12细胞进行传代培养观察其增殖情况,确定其生长期和加力前的细胞培养时间。第二部分检测周期性牵张力、乙酰胆碱作用对于C2C12细胞MEF2AmRNA和P-MEF2A蛋白表达变化的影响:实时荧光定量PCR技术检测MEF2A基因转录水平,Western Bloting检测P-MEF2A蛋白表达水平。　　 研究结果:　　 1.C2C12细胞在培养过程48h后出现增殖加速,培养96h后细胞出现接触抑制而使增殖速度减慢,同时C2C12细胞在加力板上生长增殖良好,可以选择培养48～96h的细胞移种到加力板培养备用。　　 2.对C2C12施加周期性牵张力及牵张力联合乙酰胆碱刺激12h内,MEF2AmRNA的表达表现出增高的趋势,但表达差异未发现统计学意义。各加力时间段之间,MEF2A mRNA的表达差异也未发现明显统计学意义(p>0.05).　　 3.对C2C12细胞加入乙酰胆碱,未能引起MEF2A mRNA表达的明显变化。表达差异未发现统计学意义(p>0.05)。　　 4.施加牵张力12h以内,P-MEF2A蛋白表达表现为增高的趋势,加力组1h、2h P-MEF2A蛋白的表达增高具有统计学意义(P<0.05),各加力时间段之间,P-MEF2A蛋白的表达差异未发现明显统计学意义(p>0.05)。　　 5.对C2C12细胞施加乙酰胆碱联合牵张力刺激,引起P-MEF2A蛋白表达的增高的趋势,1h、4h表达增高具有统计学意义(P<0.05)。　　 结论:　　 周期性牵张力及牵张力联合乙酰胆碱作用,在作用早期引起MEF2A表达的变化,是促进成肌细胞成肌机制的有利因素。周期性牵张力及牵张力联合乙酰胆碱刺激启动了MEF2A蛋白的磷酸化程序,P-MEF2A蛋白早期表达量增加,MEF2A磷酸化后转录活性明显增强,也可能是MEF2A mRNA转录的早期调节因素之一,有利于促进成肌细胞的成肌作用。此研究为探讨牵张力及神经刺激因素对于骨骼肌成肌细胞成肌机制的影响提供了重要的参考依据。