重组人心肌营养素在大肠杆菌中的表达及其生物活性的鉴定

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心肌营养素是一种多效性细胞因子具有广泛的生物学活性。为鉴定人心肌营养素具有促进受损大鼠心肌细胞存活及诱导肝癌细胞增殖的生物学活性,本实验构了建PQE-huCT-1表达载体,在大肠杆菌中表达重组人心肌营养素(rhCT-1);利用含有还原型及氧化型谷胱甘肽的复性体系,恢复变性蛋白的天然构象;通过MTT法鉴定rhCT-1的体内生物学活性,构建异丙肾上腺素心肌损伤模型鉴定其体内生物学活性。PQE-huCT-1在M_(15)菌中得到高效表达,但95%的目的蛋白以包涵体形式存在;通过变性、复性及Ni~+-NTA
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