昆布多酚提取、抗氧化与抑菌活性的研究

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昆布是中国传统的药食同源植物,具有软坚,行水的功效,昆布在生长和代谢过程中积累了大量如酚类、多糖等次生代谢产物,它们对生物体和人体具有重要的生理调控功能,目前为止,国内外对于昆布多糖的研究报道较多,而对昆布多酚的研究进展却鲜有报道。本论文研究昆布多酚的提取方法、体外抗氧化活性和抑菌活性,为深度开发昆布提供依据,为昆布的高附加值利用奠定理论基础。本论文探讨乙醇浸提法、超声波提取法和微波辅助提取法来提取昆布多酚,分别对三种方法进行单因素处理和响应面优化,最终确定最佳的提取工艺与工艺参数。昆布多酚提取物醇沉后,进行体外抗氧化与抑菌活性试验,其生理活性的测定结果对昆布的综合利用具有指导意义。主要研究内容如下:(1)分别对乙醇浸提法、超声波提取法和微波辅助提取法提取昆布多酚进行单因素实验和响应面优化,确定提取昆布多酚的最适工艺参数为:1)乙醇浸提法,乙醇浓度35%、液料比40:1(mL/g)、水浴时间50 min、水浴温度70℃,昆布多酚得率的均值为2.966 mg/5g;2)超声波提取法,乙醇浓度30%、液料比40:1(m L/g)、超声时间32 min、超声温度35℃,昆布多酚得率的均值为4.485mg/5g;3)微波辅助提取法,乙醇浓度30%、液料比35:1(mL/g)、微波功率450 W、微波时间100 s,昆布多酚得率的均值为8.952 mg/5g。经综合比较,微波辅助提取法更适于大量提取昆布多酚以便功能性试验研究。(2)将昆布多酚粗提物经过四次醇沉纯化后,可得到含量为38.7%的昆布多酚提取物。对昆布多酚提取物进行体外抗氧化和清除自由基能力测定,以DPPH·、·OH、O2-?自由基为研究对象,以茶多酚(含量40%)和VC作对照来分析比较昆布多酚的体外抗氧化活性。结果显示,通过测定IC50可得出对DPPH自由基清除能力:茶多酚>昆布多酚>VC;对?OH自由基清除能力:茶多酚>昆布多酚>VC;对O2-?自由基清除能力:VC>昆布多酚>茶多酚。(3)对含量为38.7%的昆布多酚提取物进行抑菌活性试验,选择枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和葡萄酒酵母这四种菌,测定昆布多酚的最低抑菌浓度。结果显示,昆布多酚提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和葡萄酒酵母的最低抑菌浓度分别为1.25mg/m L、1.25mg/mL、2.5mg/m L和5mg/m L。(4)研究了pH值与温度对昆布多酚提取物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和葡萄酒酵母抑菌活性的影响。结果显示,昆布多酚提取物会随培养基的酸碱度不同而表现出不同的抑菌活性,当pH值为7-8之间时抑菌活性最强;随着培养温度的升高,细菌和酵母的抑菌圈直径变化平缓,没有显著差异,说明昆布多酚提取物抑菌活性的热稳定性较好。
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