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妥曲珠利与地克珠利都是三嗪类抗球虫药物,临床上广泛用于预防和治疗鸡的球虫病。为了提高疗效、减缓球虫对两种药物耐药性的产生、降低临床用药成本,本研究将妥曲珠利和地克珠利,按一定比例研制成复方妥曲珠利口服溶液。
本研究首先模拟临床用药情况,在实验室采用浓度递增的方法,以0.07mg/L地克珠利为起始诱导浓度,经过9次传代,诱导出柔嫩艾美耳球虫对地克珠利的抗药性虫株。经抗药性检测,以最适抗球虫指数(POAA)、病变记分减少率(RLS)和相对卵囊产量(ROP)3项指标综合判定,获得的诱导株对1.5mg/L的地克珠利具有完全抵抗力。
通过人工感染柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株孢子化卵囊,建立鸡盲肠球虫病疾病模型,用不同浓度的妥曲珠利和地克珠利联合用药进行治疗,筛选出二药联合用药的最佳药物浓度配比,以N-甲基吡咯烷酮、1,2-丙二醇和三乙醇胺为复合溶媒(体积比为40:57:3),成功制备出2%的复方妥曲珠利溶液。对复方妥曲珠利溶液进行了18天的经典恒温加速试验、10天照度为4500±500LX的强光照射试验和药物在畜禽饮水溶液中24h的稳定性试验,全面考察了制剂的稳定性。结果表明制剂的药效成分含量、外观色泽、澄清度等方面的稳定性均满足国家关于新兽药口服溶液剂的要求。
复方妥曲珠利溶液设高、中、低3个剂量组,妥曲珠利含量分别为:20mg/L、10mg/L、5mg/L,同时以百球清为对照药物,对鸡人工感染柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株,进行临床抗球虫疗效试验。感染后第3d开始饮水给药,连用3天。以抗球虫指数(ACI)作为疗效的综合评价指标。低、中、高剂量组及百球清组的ACI分别为112.1、182.5、193.9和178.8。结果表明,中剂量组,连用3天,治疗效果较好,性价比最优。
为评价复方妥曲珠利溶液对靶动物鸡的安全性,对试验鸡连续30天饮水给药5倍、10倍和20倍推荐剂量,在试验第15d和第30d通过对增重、饲料报酬、器官系数、血液生化指标、病理组织学等观察和检测,结果表明:复方妥曲珠利溶液毒性较小,在鸡体内耐受性高,推荐剂量在临床使用中是安全的。