转GmST2基因棉花的耐盐性研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huapdf
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
盐胁迫严重阻碍植物的生长发育、限制农作物的产量增加和品质提升。超过20%的世界耕地受到盐胁迫的影响且有逐年增加的趋势。因此,增强农作物的耐盐性能够使盐碱地得到更加有效的利用。棉花作为一种主要经济作物及纤维作物,对于促进国民经济的发展起着重要作用。棉花较一些主要的农作物像水稻、小麦、玉米的耐盐性要高。虽然如此,高浓度的盐仍会对棉花的生长发育和产量造成严重的影响。因而,通过生物技术提高棉花的耐盐性,培育棉花耐盐新品种,有利于盐碱地的充分开发利用。转录因子可以调控下游多个胁迫相关基因的表达,在转基因作物遗传改良中,可通过转入一个关键的转录因子,使得不同信号途径的胁迫相关功能基因同时表达而增强作物的耐逆性。GmST2基因是从大豆中克隆出来的NAC家族转录因子,可通过与胁迫相关基因启动子区域的顺式作用元件特异性的结合,调控下游逆境相关基因的表达,从而提高转基因植物的耐逆性。本工作将来自大豆的GmST2基因转入棉花中,获得了转基因棉花。通过对幼苗苗期生理生化指标的测定和种子出苗实验对其耐盐性进行了初步测定,并通过实时荧光定量PCR对其耐盐的机制进行初步的探究,以期待了解过表达GmST2基因在棉花中提高耐盐性的机制。本工作采用农杆菌介导的棉花茎尖转化法获得转基因植株,转化幼苗经过除草剂筛选和PCR检测,阳性植株移至大田获得T1代植株,T1代植株南繁通过人工授粉让其自交结实。PCR、Southern杂交检测T2代转基因植株,结果表明,GmST2基因整合到棉花基因组中。以3个转GmST2基因的棉花株系(S1、S2、S12)和对照鲁1138作为实验材料,对棉花叶片进行离体耐盐性的鉴定,不同盐浓度下棉花离体叶片形态变化表明,在400mM和600mmM盐处理下,转基因株系的耐盐性好于对照,且叶绿素含量高于对照。采用沙培的方法种植各株系棉花,测定了盐胁迫前和250mmM盐浓度处理1天、7天、14天、21天的转基因株系及对照植株的生理指标。实验结果表明,盐处理前,各棉花株系在相对含水量、渗透保护物质含量、抗氧化酶活性、光合及荧光参数、叶片离子含量等生理指标差异不显著。盐胁迫处理后,转基因棉花的K+/Na、离子含量(Na+、K+)、相对含水量、渗透保护物质的积累、抗氧化酶活性、光合及荧光参数要高于对照株系。野生型对照株系的离子渗漏和渗透势要高于转基因株系,野生型植株的膜损伤更严重。生理生化指标表明,转基因植株的耐盐性要好于对照。种子萌发实验表明在0mM和50mM盐浓度下各棉花株系的出苗及长势没有明显的差异,随着盐浓度的升高,各棉花株系的生长及出苗都受到抑制,当盐浓度达到150mM时,对照植株的出苗率及长势明显低于转基因株系,说明转基因的耐盐性好于对照植株。为了对转基因植株耐盐的机制有一个初步的认识,依据GmST2基因在大豆以及拟南芥中过表达而引起的胁迫相关基因的表达量的变化,来确定GmST2基因能否在棉花中调控相关基因的表达。qRT-PCR结果表明GmST2基因上调了部分棉花胁迫相关基因的表达,如与棉花Na+、K+离子运输相关的基因GhNHX1、 GhAKT1、GhSOS1,棉花抗氧酶合成相关基因GhSOD1,渗透保护物质合成相关基因GhP5CS等基因,但是棉花内源的GhNAC1基因的表达却受到抑制。东营实验田数据显示转GmST2基因棉花的籽棉产量高于野生型对照的,表明转基因棉花的耐盐性要好于对照。以上结果表明,转GmST2基因棉花的耐盐性要好于对照,过表达GmST2基因可能通过促进渗透调节物质的合成、调整细胞Na+、K+的选择性运输,保持细胞较高的K+/Na+比及调节棉花胁迫相关基因的表达等机制提高转基因棉花的耐盐性。
其他文献
  针对福州海峡奥体中心体育场罩棚管网钢结构跨度大、空间复杂的特点,对整个复杂空间大跨钢结构施工过程测量技术和相关难点进行了分析,给类似工程提供参考。
混凝土面板堆石坝以其安全性、经济性、适应性等优点受到国内外坝工界的普遍重视。目前我国在建和拟建众多面板堆石坝中,有相当部分位于西南和西北的强震区,使面板堆石坝抗震
现有钢筋混凝土结构在长期的使用过程中由于材料老化、不利环境的影响以及使用的不当等给结构造成了某种程度的影响,导致混凝土结构性能退化,影响了结构的可靠性。因此,需要对现
  人字闸门为水利水电工程船闸通航建筑物。本文以武汉武船重型装备工程有限责任公司第一次承接的人字门安装工程为例,阐述了人字闸门(以下简称人字门)的主要结构特点、安装
  天津现代城工程主塔楼高339m,建成后将成为天津市区第一高楼;酒店塔楼高209m.通过介绍天津现代城工程钢板墙焊接的施工实例,从钢板墙焊接顺序的确定、钢板墙超长焊缝焊接
为了防止水土流失,目前国内采取大量的水土保持措施,许多学者对这些不同的水土保持工程的水土保持效益和环境效益进行了大量的研究。在环境恶化日趋严重的今天,农业面源污染成为
学位
  介绍了南京禄口国际机场二期工程大厅滑移施工技术,由于机场航站楼大厅屋盖的跨度较大,重量较重,工期紧,通过轨距变幅径向分块累积滑移的方法进行机场大厅屋盖安装,可以降低施
台阶式溢流坝是一种全新的泄水建筑物形式。它一改传统溢流坝在出口处集中消能的形式,使得水流在下泄过程中将能量逐渐消散,不仅有效的避免了建筑物发生空蚀破坏的危险,而且
本文通过对荣华二采区10
期刊
  目前,部分钢桥采用梁拱组合形式,梁拱之间采用箱形竖杆连接,拱肋之间采用箱形横梁连接,连接方式均为高强螺栓连接。由于在制造过程中,各个部分分开制造,在工地拼装时,又因为是螺
会议