清湿化瘀法对AM模型小鼠ras蛋白和COX2-PGE2-P450arom雌激素生成正反馈环调控机制的研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:A403537889
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目的 通过建立子宫腺肌病小鼠模型,观察具有清湿化瘀功效的内异康复片对小鼠不同动情周期在位及异位内膜ras及雌激素生成正反馈环COX2-PGE2-P450arom中各指标的表达影响,以探索内异康复片治疗子宫腺肌病的疗效及作用机制,为临床辨证用药奠定基础。方法 选取8周龄未孕雌性小鼠216只,通过同种异体垂体移植法建立子宫腺肌病小鼠模型。造模后小鼠随机分为3月模型组(3m)和6月模型组(6m)、内异康复片高剂量组(NYG)、内异康复片中剂量组(NYZ)、内异康复片低剂量组(NYD)、丹莪妇康煎膏组(DE,中药对照组)和孕三烯酮组(YSXT,西药对照组),另设有正常对照组(Normal)和假手术组(Sham)。每组均24只。术后常规饲养3月,将3月模型组、假手术组、正常组小鼠分别于动情期和间情期处死,每期各12只;其余组小鼠予以不同药物灌胃3月,6月模型组继续常规饲养,3月后各组小鼠分别于动情期和间情期处死,每期各12只。通过病理切片HE染色,观察各组造模前后及用药前后小鼠子宫的病理改变,并对子宫严重程度进行分级评分,同时采用免疫组化技术检测小鼠动情期和间情期子宫在位及异位内膜ras、COX2、PGE2和P450arom蛋白的表达差异。结果1.假手术组小鼠子宫病理分级评分与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。2.造模后,3月和6月模型组小鼠子宫病理分级评分与正常组相比均显著升高(P<0.01),且6月模型组显著高于3月模型组(P<0.01)。3月和6月模型组小鼠动、间情期子宫在位及异位内膜ras、COX2、PGE2和P450arom的表达量均显著高于正常组,差异有统计学意义(P<0.01);且ras、COX2、PGE2和P450arom在6月模型组表达显著高于3月模型组(P<0.01)。动情期及间情期小鼠子宫异位内膜ras、COX2、PGE2和P450arom的表达均显著高于在位内膜(P<0.01)。3.给药后,相比6月模型组,内异康复片高剂量组、中剂量组、丹莪妇康煎膏组和孕三烯酮组动情期和间情期于在位及异位内膜ras和COX2、PGE2、P450arom的表达均显著降低(P<0.01),且内异康复片高剂量组的表达显著低于丹莪妇康煎膏组和孕三烯酮组(P<0.01)。内异康复片高、中、低剂量组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。4.相关性分析,ras与COX2-PGE2-P450arom呈正的相关关系(P<0.01)。结论1.子宫腺肌病的发生与ras和COX2-PGE2-P450arom的高水平表达有关,且两者呈正相关。2.高剂量内异康复片疗效优于丹莪妇康煎膏和孕三烯酮,且高剂量内异康复片的疗效优于中、低剂量。3.内异康复片治疗子宫腺肌病可能是通过降低在位及异位内膜ras、COX2、PGE2、P450arom水平,弱化雌激素效应实现。4.手术操作的机械损伤不会对实验造模结果产生影响。
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