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背景及目的近年来许多研究表明,LRIGs基因家族在垂体瘤、神经胶质瘤和皮肤鳞状细胞癌等多种肿瘤中具有抑癌作用,分析其机制可能是通过下调EGFR的表达抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭等作用。但是对于其在膀胱癌方面的研究较少,尤其是对于多种膀胱癌细胞株生物学行为的检测分析还未见报道。本实验的目的在于,建立稳定表达LRIG3基因的多种膀胱癌细胞株,系统观察分析LRIG3对稳定表达LRIG3基因的膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU-87在生长、侵袭及凋亡等方面的影响,全面评价LRIG3基因对膀胱癌的作用及可能机制。方法提取目的基因,通过琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切、连接、转化入感受态大肠杆菌DH5a菌株并从中提取并大量制备pLVX-DsRed-LRIG3真核表达质粒,然后再进行限制性内切酶酶切、琼脂糖凝胶电泳法及DNA测序进行鉴定。鉴定正确无误后,转染入EJ、T24和BIU-87膀胱癌细胞中。通过RT-PCR和Western Blotting技术测定各组膀胱癌细胞LRIG3 mRNA和蛋白的表达。使用Transwell小体测定EJ、T24和BIU-87膀胱癌细胞株各组的体外侵袭能力。运用Annexin-V/7-aad双染法检测三种膀胱癌细胞的凋亡情况。采用流式细胞仪观察分析LRIG3对三种膀胱癌细胞的诱导效应。结果经过限制性酶切、PCR及DNA测序鉴定,pLVX-DsRed-Monomer-LRIG3构建成功,与对照组相比,三种膀胱癌细胞株EJ、T24和BIU-87实验组LRIG3 mRNA的表达水平分别上升79.2%、68.6%和60.3%,差异具有统计学意义(P<0.05); LRIG3蛋白的表达水平则分别上升90.5%、78.6%和68.2%,差异显著(P<0.05)。实验组作用24h后三种膀胱癌细胞株EJ、T24和BIU-87的增殖和侵袭能力显著减弱。过表达的LRIG3基因诱导EJ和T24细胞S+G2/M期阻滞：结果表明,实验组EJ和T24细胞中S期和G2/M期细胞数之和显著低于对照组(P<0.05)。BIU-87细胞变化未见明显统计学意义。凋亡检测结果显示在EJ、T24和BIU-87细胞中,实验组的凋亡细胞均显著多于对照组。结论使用慢病毒载体系统成功构建携带有LRIG3基因的重组质粒并将其成功转染膀胱癌细胞株；转染后的三种膀胱癌细胞株,LRIG3 mRNA和蛋白水平都明显提高,实验结果表明LRIG3可以明显降低膀胱癌细胞的侵袭能力,阻滞膀胱癌细胞生长和促进膀胱癌细胞的凋亡。