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前言：
动脉粥样硬化(athero sclerosis,AS)是严重危害人类健康的心血管内科常见病之一。在AS发病机制中,血管内皮细胞的功能障碍和损伤被认为始动因素。但随着研究的深入,血管外膜作为AS发生发展的重要因素日益受到重视。既往研究揭示,外膜不但对正常血管结构和功能起调节作用,AS引起的血管重塑也与外膜有关。而伴随着AS的发生发展,血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的形态结构功能也发生着变化,有研究者发现血管外膜同样参与到对VSMC的调节。
RhoA/ROCK信号系统广泛分布于哺乳类动物的组织细胞中,是具有信息传导和分子开关功能的信号多肽。新进研究表明,RhoA/ROCK信号系统在影响VSMC增殖和蛋白表型变化方面也发挥重要作用。研究发现,VSMC可以表达收缩表型和合成表型两种结构蛋白,而且当生长环境改变时(AS、高血压、肿瘤等),VSMC可发生两蛋白表型间的相互转化。心肌素(Myocardin)作为重要的VSMC发育分化、特异性基因表达等细胞进程的调节因子,在调控VSMC蛋白表型转化方面也发挥重要作用。同时,RhoA/ROCK信号系统和Myocardin在调节VSMC的蛋白表型变化方面关系密切。
目的：
本研究正是采用了硅胶管包裹大鼠颈动脉的方法建立血管外膜慢性炎症性损伤介导的AS模型,观察大鼠颈动脉VSMC形态结构和蛋白表型的变化,探讨RhoA/ROCK信号途径在该模型中是否发挥对VSMC增殖和蛋白表达的调控作用,及可能的机制和意义。
方法：
Wistar大鼠12只,按随机数字表法均分为模型组和对照组,其中模型组用硅胶管包裹大鼠颈动脉1周造成血管外膜的慢性炎症性损伤,取材后做标本H-E染色分别观察两组血管形态学变化,用RT-PCR和Westernblot检测血管组织中SMα-actin、Myocardin、RhoA,ROCK2的表达。
结果：
与对照组相比,模型组大鼠颈动脉血管外膜增厚,炎性细胞浸润,中膜平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)增生,排列紊乱;模型组大鼠颈动脉中SMα-actin的mRNA水平和蛋白表达水平较对照组均增高;Myocardin的mRNA水平低于对照组,而Myocardin的蛋白表达水平较对照组无明显差异;RhoA的mRNA水平和蛋白表达水平均高于对照组;ROCK2的mRNA水平和蛋白表达水平较对照组均明显增高。
结论：
1、用硅胶管包裹大鼠颈动脉1周造成血管外膜的慢性损伤(模型组)后,出现类似于AS样的血管形态学变化,表现为大鼠颈动脉VSMC大量增生增殖。
2、模型组大鼠颈动脉表现为以收缩能力较强的蛋白标志物表达(SMα-actin表达水平明显增高)为主的VSMC分化状态。进一步证实了包管1周的模型组大鼠颈动脉收缩性增强。以上结果有可能与RhoA/ROCK信号途径(模型组RhoA、ROCK2表达水平明显增高)的激活有关。
3、虽然模型组大鼠颈动脉VSMC中SMα-actin的表达水平明显增高;但是Myocardin的表达水平与对照组相似。说明该模型中中SMα-actin表达上调与Myocardin的表达水平无关。