SPIO-MSCs归巢至肿瘤转移灶及其7.0T MR影像学表现

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Vanix
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
第一部分:间充质干细胞的分离培养以及SPIO的转染目的将超顺磁性氧化铁(SPIO, superparamagenetic iron oxide)转染至培养的原代间充质干细胞(MSCs, mesenchymal stem cells),检测SPIO的细胞毒性,测定MSCs细胞内的转铁量与培养基内SPIO浓度的剂量依赖关系,并测定转染SPIO后的MSCs在体外培养的条件下细胞内的铁含量随时间变化关系。方法1)冲洗幼年SD大鼠胫骨、股骨骨髓腔,将分离出的MSCs于体外培养传代,使用脂质体作为转染剂通过共培养的方式将SPIO转染至MSCs细胞内;2)使用透射电镜以及普鲁士蓝染色的方法检测转染至MSCs细胞内的SPIO颗粒;3)使用CCK-8试剂盒检测不同SPIO浓度(20 ug/ml、40ug/ml、 80 ug/ml、120ug/ml、160ug/ml)对细胞活性的影响;4)使用原子吸光光度法测定不同SPIO浓度条件下MSCs细胞内的铁含量以及以SPIO (160 ug/ml)转染MSCs后该细胞于1天、3天、5天、7天、9天、11天时MSCs细胞内的铁含量。结果1)透射电镜可见转染SPIO后的MSCs细胞内有高密度的致密颗粒物,普鲁士蓝染色结果可见MSCs内的蓝染颗粒物;2) MSCs在不同SPIO转染浓度条件下的OD值之间比较无统计学意义(P>0.05);3)当SPIO的转染浓度为20 ug/ml、40 ug/ml、80 ug/ml、120 ug/ml、 160 ug/ml时,每个MSCs细胞内铁含量分别为3.8 pg、6.6 pg、13.7 pg、 18.5 pg、23.7 pg;4)随着MSCs的分裂,转染浓度为160 ug/ml的MSCs第1天、3天、5天、7天、9天、11天时其细胞内铁含量分别为21.3 pg、10.7 pg、 4.2 pg、1.9 pg.0.9 pg、0.5 pg。结论1)使用脂质体可以成功将SPIO转染至MSCs内;2)使用高浓度SPIO转染MSCs也不会对MSCs的细胞活性造成明显影响;3) MSCs转铁量与培养基中SPIO浓度呈正相关,且转铁后的MSCs内的铁含量会随着时间推移而相应减少。第二部分:C6胶质瘤肝转移模型的构建及其影像学表现目的通过肝门静脉注射体外培养的C6胶质瘤至裸鼠肝脏来构建C6胶质瘤血行肝转移模型。对构建的模型进行HE染色,免疫组化染色,大体形态学观察来了解该模型的基本特性,并使用3.0T磁共振(MR,magnetic resonance)对所构建的转移瘤模型进行扫描,了解该转移瘤的核磁共振成像(MRI, magnetic resonance imaging)的影像学特征。为后续实验的开展奠定基础。方法1)手术暴露裸鼠肝门静脉,经肝门静脉注射C6胶质瘤细胞至36只裸鼠肝脏;2)于注射胶质瘤后的7天、14天、21天时随机抽取建模裸鼠12只行3.0T MRI T1WI、T2WI扫描;3)取经MRI扫描后的建模裸鼠肝脏组织对其进行大体形态学观察、HE染色、S-100beta免疫组学染色。结果1)HE染色于注射细胞7天时最早发现裸鼠肝脏组织内肿瘤转移灶的形成;注射细胞14天时,大体形态学和3.0T MRI T2WI可观测到裸鼠肝脏组织肿瘤转移灶的形成,而T1WI不能发现转移灶;注射细胞21天时HE染色、大体形态学、3.0T MRI T2WI及T1WI均能发现转移灶,相应改变较14天组更加明显;2)组织切片S-100beta免疫组化结果见肿瘤转移灶染色呈阳性;3)转移灶在MRI T2WI上表现为高信号改变,且对于较大结节3.0T MRI能显示其内坏死及瘤周水肿。结论1)该方法可用于胶质瘤血行肝脏转移动物模型的构建,且成功率高重复性好;2)使用该方法构建的胶质瘤血行肝脏转移动物模型其转移灶于14天后可被3.OT MRI很好的检测到,且对于肿瘤转移灶的检测T2WI较T1WI敏感性高。第三部分:SPIO-MSCs归巢至肿瘤部位的MR检测目的将体外标记的携带有SPIO的MSCs通过尾静脉注射至构建的胶质瘤血行肝转移的裸鼠模型体内,通过MSCs的归巢作用将SPIO转运至肿瘤灶。使用7.0T MR对注射细胞后的建模裸鼠肝脏进行扫描,以确定通过MSCs的归巢作用将SPIO转移至肿瘤转移灶的方法是否足以引起肝脏组织肿瘤转移灶在7.0T MR上的信号改变。方法1)将构建的胶质瘤肝转移模型裸鼠随机分为两组(每组3只),分别通过尾静脉注射未标记MSCs(1x106个/只)、SPIO-MSCs(1x106个/只)至2组模型裸鼠体内;2)与注射细胞9天时使用7.0T MR扫描2组裸鼠肝脏组织得到相应的T2WI信号强度值、T2*值;3)将裸鼠肝脏组织行冰冻切片并用普鲁士蓝染色的方法寻找标记的SPIO-MSCs。结果1)2组模型裸鼠正常肝脏组织之间的T2WI信号强度及T2*值(T2*弛豫时间)比较无统计学意义(P>0.05),而对肿瘤转移灶部位的T2WI信号强度及T2*值检测发现,SPIO-MSCs组肿瘤转移灶T2WI信号强度较MSCs组下降,T2*值缩短,结果有统计学差异(P<0.05);2)模型裸鼠肝脏组织的冰冻切片经普鲁士蓝染色可见SPIO-MSCs注射组裸鼠肿瘤灶出现被蓝染的颗粒物为体外标记MSCs。结论MSCs能归巢至肿瘤灶部位,并可将其内携带的SPIO转运至肿瘤灶部位。聚集于肿瘤灶部位的SPIO于7.0T MR下可引起该部位T2WI信号强度及T2*值的改变。
其他文献
设计了一种骨龄自动分析评测系统,该系统由骨龄片影像采集模块、骨龄评测分析模块、骨龄评测综合报告模块、治疗套餐生成模块以及综合检查结果合成模块组成,可快速计算出患者预
<正> 泥炭沼泽森林和"黑水"2004年6月初,我只身来到了马来西亚首都吉隆坡北部的一个小镇丹绒马林(Tanjong Malim)。她位于首都所在的雪兰峨州(Selangor)与有名的过背金龙产地
研究生应当树立远大理想,力争到更重要的岗位上发挥更大的作用。为了实现理想,必须奋斗,要想取得超人的成就,必须付出超人的努力。奋斗不可一曝十寒,必须持之以恒、坚持不懈,
在实验室控制条件下,研究了日本霞浦湖土浦湾和湖心区底泥中形态氮磷,在好氧和厌氧条件下水土界面交换量变化及差异.结果表明:好氧条件下,NO3--N、NO2--N、NH4+-N、和PO43--P均有
<正> 利用家有庭院、阳台种植花卉,或于居室房间里点缀盆景、盆栽,不仅能美化环境,为生活增添情趣,还能显示出主人的好客之情。由于居室有大小之别,采光布局也各有迥异,因此,
期刊
<正>一、问题的提出[案例]原告深圳泛信化工有限公司于1990年2月12日向中国建设银行深圳市罗湖支行借款人民币300万元,并以位于深圳市南山区南油开发区中兴工业城第1栋第3、4
随着计算机与互联网的迅速发展,网络对于人们的日常生活产生了巨大的影响,人们在享受网络带来的便捷时,也遭受了各种困扰。在使用网络购物以及办公的过程中,个人信息与隐私在
装配型架的骨架布局设计需要综合考虑与装配产品和定位夹紧件的约束关系,设计过程繁琐复杂,且很难达到最优设计。为了提高骨架的设计效率和设计质量,提出一种基于最小二乘法的骨
<正>会计是企业、事业单位财务状况的晴雨表、指示器,会计作为一门经济语言,对公司的发展至关重要。随着近几年来我国经济的迅速发展与进步,对会计人才的需求越来越大、对会
会议
谢彬的《新疆游记》一书,是他九十多年前前往新疆和阿尔泰特别区调查财政时的日记。书中除了调查财政外,还寻访古迹,记录沿途风光,了解地理沿革,收集传说及地名来历,关注民族构成与