研究背景先天性白内障是一类严重影响儿童视觉健康的疾病,包括两种类型,一种是出生后即存在晶状体的浑浊,另一种是出生后1年内再形成的晶状体浑浊。大多数患儿需要手术治疗,由于儿童生长发育的特殊性,手术后易发各种并发症,在其特殊的视觉发育过程中,视力及视功能均受不同程度影响,成为眼科临床治疗的难题。因此,探究其发病原因和机制,以采取有效防范措施,降低其发病率,是眼科学的重要课题。近年来国内外大多数研究者认为,约有1/3的先天性白内障与遗传因素有关,还有1/3病例的发病原因和环境因素特别是病毒(风疹、麻疹、水痘、单纯疱疹等)有关,另有1/3为机制不明的散发病例。小儿眼科学者普遍认为在胚胎形成过程中,诸如病毒,寄生虫等病原体的感染,对先天性白内障的发病起着重要的影响。病毒作为基因突变的一个重要的诱发病原,可能导致基因的位移、重排或缺失等改变,突变结果产生致白内障基因,特别在是胚胎形成期传递非正常基因信息,对先天性白内障的形成可能起着重要的作用。细胞内寄生的弓形虫也会影响正常巨噬细胞的功能,使宿主细胞产生凋亡,引发眼内炎症导致白内障的发生。TORCH病原抗体检测作为巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹I (HSV Ⅰ)和Ⅱ型病毒(HSVⅡ)、风疹病毒(RV)和弓形虫(TOX)等五类病原的抗体IgG及IgM测定,可以反映患儿是否在胚胎期曾经遭受过病毒和寄生虫的侵袭以及出生后的获得性感染。我院常规开展门诊相关患病儿童和住院白内障及非白内障儿童的酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测(?)TORCH病原抗体。本研究通过白内障组与非白内障组住院或门诊患儿检测出的TORCH抗体阳性率比较,试图寻找TORCH病原感染与白内障发生的相关性,根据统计的结果来评价现行的TORCH检测实际临床意义,进一步发现病毒和寄生虫因素在先天性白内障发生中所占的病因学份额,为进一步研究先天性白内障的发病机制提供更加合适的研究方向和发现更多的证据。研究目的回顾性分析总结来自2006年5月～2013年9月间浙江大学医学院附属儿童医院,有完整血清TORCH病原抗体(包括CMV. HSVⅠ和HSVⅡ、RV和TOX等五类病原)IgG及IgM检测记录的69例先天性白内障患儿为研究组,与随机抽样的同期非白内障住院患儿289例和新生儿151例进行平行比较,并与2010年10月～2013年9月门诊11963例有相关抗体检测记录的就诊患儿进行横向比较,研究探讨上述病毒和寄生虫感染与先天性白内障发生的相关性,评价在先天性白内障患儿中进行TORCH检测的临床意义,发现新的现象,探讨更有价值的研究方法。研究对象与方法1.研究对象1.1白内障组明确诊断的先天性白内障儿童69例,均为入住儿童医院需要手术治疗的患儿,男33例,女36例,年龄1个月9天～11岁6个月,平均年龄19.57±22.164个月,其中单纯白内障的患儿36例,合并有眼球震颤、心脏病等其他系统疾病的33例；单眼白内障患儿32例,双眼白内障患儿37例。所有患儿均有胸片,心电图,双眼、心脏及腹部B型超声等检查,人类免疫缺陷病毒(HIV)及梅毒螺旋体特异性被动血凝试验(TPHA)检测阴性。已排除有明确家族白内障遗传病史的病例。1.2对照组两组1.2.1平行对照组：随机抽样的同期非白内障住院患儿289例,其中男143例,女146例,年龄29天～13岁7个月,平均年龄17.71±27.731个月和新生儿住院患儿151例,男78例,女73例,年龄1天～28天,其中新生儿患儿有无同时伴发先天性白内障情况不明确。患儿疾病中包括有先天性心脏病、先天脑发育不良、癫痫、肾炎肾病、肝功能异常、病毒性脑炎、白血病、呼吸道及泌尿道感染等各类内科外科病种。未发现明确的家族遗传病史,有HIV和TPHA检测记录的病例均为阴性结果。1.2.2横向对照组：作为接近普通人群组趋势的对照,取至2010年10月～2013年9月门诊有相关电脑存档检测记录的11963人次就诊患儿,男7243例,女4720例,年龄1天～16岁11个月。年龄呈前两组类似的偏态分布。有外伤、呼吸系统感染、肾病、脑炎、肿瘤、先天性心脏病、先天畸形、内分泌相关代谢性疾病等各科病种。家族遗传病史和HIV、TPHA检测记录不明。所有病例检测报告均为TORCH检测阳性或阴性结果,删除所有报告为阳性可疑的病例。所有住院病历均有家长签署的知情同意书。2.研究方法采用回顾性设计,分组随机配对研究的方法。2.1临床检查：所有入选白内障均行常规眼部检查,包括眼前段裂隙灯检查、眼压等检查,托品酰胺滴眼液散瞳白内障形态、间接眼底镜眼底检查,双眼、心脏及腹部B型超声、胸片、心电图等检查。平行对照组中非新生儿患儿查询病历未见眼部明显异常；新生儿因年龄太小,新生儿科医生体检困难等原因,无详细眼科检查记录,故有无伴发白内障情况不明确。横向对照组没有眼部专科检查记录,只截取门诊电脑记录诊断。2.2实验室检查：2.2.1标本采集所有受检对象均采集清晨空腹外周静脉血1-2毫升,室温静置不超过8小时,预计超过8小时才能试验的样本则采集后即刻存放在2-10℃冰箱中,预计超过24小时后才能试验的样本则采集后即刻于-20℃冰箱保存,所有样本均在二天内集中完成检测。成批检测。2.2.2测定方法采用ELISA法测定血清TORCH抗体IgG和IgM。试剂盒购自美国Trinity Biotech Plc公司,所有受检者均用同一产地公司试剂,具体操作步骤严格按照说明书进行。2.3统计学分析所有统计数据使用SPSS19.0软件包计算,计数资料以百分数、构成比表示,计量资料以均数±标准差表示。年龄采用方差方程Levene检验、均值方程的t检验。性别构成以及比较白内障组和对照组的抗体表达抗性率差异采用完全随机设计四格表资料的χ2检验。研究结果1.比较白内障组、‘平行对照非新生儿组的年龄、性别构成等差异未见有统计学意义(p>0.05)2.白内障组血清HSVⅡ-IgG阳性率为7.20%、IgM阳性率为1.40%,平行对照的非新生儿组为2.10%、1.40%,两组IgG及IgM阳性率差异未见有统计学意义(p>0.05)。3.白内障组HSV Ⅰ-IgG阳性率为10.10%、IgM阳性率为1.40%,平行对照的非新生儿组为9.00%和0.30%,两组IgG及IgM阳性率差异未见有统计学意义(p>0.05)。4.白内障组RV-IgG阳性率为5.80%、IgM阳性率为1.40%,平行对照的非新生儿组为4.80%和1.40%,两组IgG及IgM阳性率差异未见有统计学意义(p>0.05)。5.白内障组TOX-IgG阳性率为0.00%、IgM阳性率为0.00%,平行对照的非新生儿组为0.30%和0.30%,两组IgG及IgM阳性率差异未见有统计学意义(p>0.05)。6.白内障组CMV-IgG阳性率为23.20%、IgM阳性率为14.50%,平行对照的非新生儿组为23.50%和14.20%,两组IgG及IgM阳性率差异未见有统计学意义(p>0.05)。7.非新生儿中平行对照组和和横向对照组的比较,HSV Ⅰ-IgG、HSV Ⅱ-IgG、 TOX-IgG和IgM阳性率差异未见统计学意义。RV-IgM、CMV-IgM阳性率差异未见统计学意义。但RV-IgG、CMV-IgG阳性率差异有统计学意义,平行对照组较高。8.白内障组与横向对照非新生儿组的比较中RV-IgG、CMV-IgG阳性率差异未见统计学意义,但ISVE-IgG的阳性率差异却有统计学意义,白内障组较高。其他TORCH抗体和平行对照组的结果相似,各抗体阳性率差异无统计学意义。9.新生儿和非新生儿的检测结果比较,则发现HSVⅡ-IgG、HSVⅠ-IgG、 CMV-IgG和HSV Ⅱ-IgM、HSV Ⅰ-IgM、CMV-IgM阳性率差异均有统计学意义,三种病毒的IgG抗体新生儿明显增高而IgM抗体阳性率低与非新生儿；TOX-IgG新生儿较高但TOX-IgM阳性率没有区别；RV-IgM非新生儿阳性率较高而RV-IgG未见差异有统计学意义。10.性别之间的阳性率有一些区别,表现为HSVⅡ-IgG, HSV Ⅰ-IgG、CMV-IgG女孩较高但HSV Ⅱ-IgM、HSV Ⅰ-IgM、CMV-IgM阳性率没有差别,差异有统计学意义。11.单眼或双眼发病的先天性白内障之间,以及单纯性白内障和伴有其他系统疾病的患儿之间TORCH抗体的检测阳性率差异未见统计学意义的结果。研究结论1.本研究发现先天性白内障患儿中HSVⅡ-IgG抗本检测出的阳性率较高,提出：除风疹病毒外,HSV也可能是导致先天性白内障的TORCH归属病毒。2.研究发现先天性白内障儿童血清TORCH阳性率与其他不良妊娠相关疾病的结果相近,证实了研究组先天性白内障儿童也应是不良妊娠疾病中的一个重要组成部分,其发生可能与TORCH病原感染有关。3.本研究中新生儿患儿HSV Ⅱ-IgG、HSV I-IgG、CMV-IgG、TOX-IgG抗体检测阳性率较高,而代表出生后自身获得性感染而出现的HSV Ⅱ-IgM、 HSV Ⅰ-IgM、CMV-IgM抗体却较低,提示该类IgG抗体多数为母源性抗体的可能较大。也提示在新生儿早期筛查发现先天性白内障并对其进行TORCH检测,更能发现与宫内感染相关的流行病学线索。因此,本研究在先天性白内障的病因学研究中有向导性作用。4.研究中还发现性别间存在着差异,女性患儿HSVⅡ、HSVⅠ及CMV的IgG抗体表达较高,提示这些抗体是否有某些特殊的生物学作用机制有待研究。5.对单眼或双眼白内障发生率的在TORCH表达的对照中,研究显示无相关性,未能支持早期学者认为先天性白内障单侧与双侧发病有某些不同病因的观点。单纯性白内障和伴有其他系统疾病的患儿之间没有差异,考虑病毒在同源组织中的致病过程可能有类似的机制过程。6.血清TORCH的检测简便,对高危人群进行择期和选择性的检测,特别是在新生儿早期筛查中发现出的先天性白内障患儿中进行检测,更能发现流行病学的线索,可作为儿童先天性白内障的病因学检测指标。进一步结合调查孕前和孕期妊娠妇女的血液样本结果,提早发现危险因素,可予明确相关的预防性免疫治疗,以降低先天性白内障的发生危险。