【摘 要】
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颅内动脉瘤(IA)的形成机制目前仍不清楚。血流动力学因素所致的血管内皮损伤被认为是其形成和发展的重要因素。环状RNA(circRNA)分子是新近发现的一类特殊类型的非编码RNA,在许多基因信号通路中发挥调控作用。为了阐明血流动力学对血管内皮细胞(ECs)环状RNA功能的影响,我们采用模拟动脉分叉处的血液动力学环境自行设计制作的“T”型流室系统用于实验,来冲击细胞层。采用高通量环状RNA微阵列芯片用
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颅内动脉瘤(IA)的形成机制目前仍不清楚。血流动力学因素所致的血管内皮损伤被认为是其形成和发展的重要因素。环状RNA(circRNA)分子是新近发现的一类特殊类型的非编码RNA,在许多基因信号通路中发挥调控作用。为了阐明血流动力学对血管内皮细胞(ECs)环状RNA功能的影响,我们采用模拟动脉分叉处的血液动力学环境自行设计制作的“T”型流室系统用于实验,来冲击细胞层。采用高通量环状RNA微阵列芯片用于分析500mL/min流速下的冲击流作用前后ECs中环状RNA的差异表达谱。通过生物信息学手段分析差异表达的环状RNA的特征,芯片结果应用RT-qPCR验证。生物信息学靶点分析用于预测差异表达的环状RNA可能涉及的细胞调控通路,构建调控网络,并对各节点之间的相互关系进行RT-qPCR、western blot和荧光素酶实验的验证。我们发现,血管内皮细胞在冲击流作用后,许多环状RNA的表达发生变化,总共发现974个差异表达(FC≥2和P<0.05),其中378个表达上调和596个表达下调,提示这些差异表达的环状RNA可能参与了ECs的迁移,炎症,损伤和凋亡等过程。对circRNA进行生物信息学分析及靶点预测,提示hsa-circ-0049241-miR-221-3p-ICAM-1通路可能参与调控血流动力学引起的血管内皮细胞损伤。RT-qPCR和western blot初步验证该通路各节点的表达差异符合该通路相互调控之间的变化关系。然而,进一步的萤光素酶实验尚无法证实hsa-circ-0049241与miR-221-3p存在相互作用结合位点。CircRNA可能参与调控血流动力学引起的血管内皮细胞损伤,但具体调控通路仍有待进一步研究。
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