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在脊椎动物中，鱼类是性别决定方式最为多样的一个类群。与高等脊椎动物一样，鱼类性别决定的基础仍然是遗传基因，但不同的是在许多鱼类，决定性别的基因并不明显地集中于性染色体上，常染色体上的基因更多地参与到性别决定中。另外，在发育早期，鱼类的性别更明显地表现为双向潜力：某些外部环境因素能在不同程度上影响鱼类的性别分化，从而使鱼类性别决定机制更加复杂。由于鱼类的性别决定机制是多样的和易变的，因而可以通过分子生物学的研究从基因水平进行探讨，来揭示罗非鱼的性别决定机理，为进一步提高罗非鱼雄性率奠定基础。 DMRT(DM-related transcription factor)基因是哺乳类，爬行类，鸟类，以及鱼类等动物上的性别相关基因，形成DMRT基因家庭，编码一种结合在DM-binding motif(DM-domsin)的蛋白质，DMRT1基因在鱼类雄性分化方面起着关键的作用。它含有果蝇里的dsx(double-sex) 基因和线虫里的mab-3基因共有的DM-domain(doublesex和mab-3基因编码的蛋白质结合的DNA基序)。本研究拟对奥利亚罗非鱼的DMRT1基因与其它鱼类的DMRT1基因进行比较，分析，为以后进一步研究罗非鱼性别分化相关基因打下基础。 1．DM-domain区的扩增 根据已知鱼类DM-domain区的保守序列，设计上游引物P1和下游引物P3，扩增得到奥利亚罗非鱼DMRT1基因的DM-domain区序列158bp，将158bp碱基片段在NCBI网站上进行BLASTP分析，扩增出的158bp碱基与尼罗罗非鱼的DMRT1基因同源性最高，达到148个相同的碱基，96％的相似性。其次为黑鲷的DMRT1基因，由于扩增出的区域是DM-domain的保守序列，所以在虹鳟，乌拉圭牙汉鱼，黑青斑河豚，红鳍东方，黄鳝，大西洋真鳕，青鳉鱼等动物的DMRT1基因中都呈现出较高的相似性。 2．雄鱼特异条带的扩增(male specific motif) 根据得到的DM-domain区的保守序列，设计上游引物P5，根据已知鱼类male specinc motif的保守序列，设计下游引物P4，扩增得到481bp，，其中奥利亚罗非鱼DMRT1基因的雄鱼特异保守序列(male specific motif)72bp，将male speciflc motif碱基片段在NCBI网站上进行BLASTP分析，与尼罗罗非鱼的DMRT1基因同源性最高，100％的相似性。其次为黑鲷的DMRT1基因，在虹鳟，乌拉圭牙汉鱼，黑青斑河奥利亚罗非鱼DMRTI基因的克隆及其性别决定机制的研究豚，红鳍东方，黄鳝，大西洋真鳍，青鳃鱼等动物的DMRTI基因中都呈现出较高的相似性。3.3’RACE的扩增 根据扩增出的DM一domain的序列，设计上游引物Primers，Primer6，用3’.RACE(rapid田力plification of cDNA ends)法从奥利亚罗非鱼精巢中分离和测定了DMRTIcDNA的序列。3’.RACE扩增得到1 086bp的片段，共编码254个氨基酸，与尼罗罗非鱼、黑纲、黄鳝、新月鱼、虹缚、青鳃鱼等动物的DMR江，1的氛基酸序列进行比较，同源性分别为:99%，80%，78%，73%，62%，41%。说明DMRTI基因在同物种中有高度的同源性.和尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼等动物的DMO氛基酸序列进行比较，同源性分别为:26%，26%。这么低的同源性说明雄鱼和雌鱼的性别决定机制有很大的不同。有关DMRTI基因表达的蛋白及其功能，还有待于进一步研究.