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目的:对苦玄参的原植物形态及同一产地不同生长期的苦玄参药材不同药用部位叶、茎,根的生药学特征研究,并分别对叶、茎,根中的苦玄参苷(I)A进行了动态积累研究以及对10批次不同生长期的苦玄参叶和茎进行HPLC指纹图谱研究,观察叶和茎中成分的动态变化。
方法:①鉴别:采用生药学方法观察同一产地两个不同生长期(2006年8月和2006年12月)苦玄参药材不同药用部位叶、茎和根的性状、显微特征及理化鉴别特征。
②动态积累研究:以苦玄参苷(I)A为指标,采用反相高效液相色谱法(RP—HPLC),C18ODS2柱分离,流动相为乙腈-0.1%冰醋酸溶液(36∶64),流速为1ml/min,检测波长为264nm,柱温为25℃,对同一产地不同生长期苦玄参药材不同药用部位叶、茎和根进行动态积累研究。
③指纹图谱研究:以苦玄参苷(I)A为参照物,采用反相高效液相色谱法(RP—HPLC),C18ODS2柱分离,乙腈-0.1%冰醋酸溶液梯度洗脱,流速为1ml/min,检测波长为264nm,柱温为25℃,对10批同一产地不同生长期(2006年7月-2007年4月)苦玄参药材的叶和茎分别进行指纹图谱研究,数据使用“计算机辅助相似度评价软件”进行处理。
结果:①鉴别:生长期不同,通过对(2006年8月和2006年12月)苦玄参药材不同药用部位叶、茎和根的性状、显微特征进行鉴别,结果表明两个时期的性状、显微特征明显不同;化学定性反应分析结果显示,苦玄参根、茎、叶都含有三萜皂苷类成分,在根、茎、叶的75%甲醇超声提取液的紫外-可见光谱扫描图中表明根、茎、叶的吸收峰位大体相似,提示根、茎、叶中所含主要成分有可能相同。在进行苦玄参全草、叶、茎和根的TLC鉴别,以苦玄参苷(I)A为对照品,选用氯仿:甲醇(4∶1),乙酸乙酯(4∶1)为展开剂,各斑点分离完全,效果较好,均显示含有苦玄参苷(I)A。②动态积累研究:本实验对苦玄参全草分取不同药用部位叶、茎、根进行了动态积累研究,结果苦玄参叶中苦玄参苷(I)A的平均含量从头年6月份到次年1月份分别为1.27%、2.18%、1.97%、1.44%、1.23%、1.15%、1.04%、0.82%;苦玄参茎中苦玄参苷IA的平均含量从头年6月份到次年1月份分别为0.80%、1.22%、1.23%、0.75%、0.34%、0.26%、0.10%、0.07%;苦玄参根苦玄参苷(I)A的含量在7月份是最高,其余月份含量极低,几乎没有。③指纹图谱研究:本实验中,使用“计算机辅助相似度评价软件”处理数据,苦玄参叶中自动匹配17个共有峰,不同批次苦玄参叶的指纹特征相似度均大于0.90,苦玄参叶与软件共有模式生成的对照指纹图谱的相似度大于0.90;茎中自动匹配23个共有峰,不同批次苦玄参茎的指纹特征相似度均大于0.80,苦玄参茎与软件共有模式生成的对照指纹图谱的相似度大于0.90。
结论:生长期不同,苦玄参不同药用部位的性状、显微特征有明显的不同;对同一产地苦玄参药材不同生长期不同药用部位叶、茎,根中的苦玄参苷(I)A进行了动态积累研究以及叶和茎进行了指纹图谱研究,动态积累研究中建立的高效液相色谱含量测定方法灵敏度高,专属性强,重现性好,能准确、快速的进行测定,以苦玄参苷(I)A的含量为标准,苦玄参不同药用部位的苦玄参苷(I)A均在7、8月份的含量最高,可以确定最佳采收季节为7、8月份。建立了苦玄参药材不同部位叶和茎的HPLC指纹图谱,得到其对照图谱,方法重现性和精密度良好,观察叶和茎中成分的动态变化。以上实验均有助于苦玄参药材的标准化种植及药材的质量控制。