血管内皮祖细胞移植对大鼠急性胰腺炎胰腺微循环改善作用的实验研究

来源 :泸州医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:szcentsweb
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本实验通过检测血管内皮祖细胞(Endothelial progenitorcells,EPCs)移植到牛磺胆酸钠诱导的大鼠急性胰腺炎模型的CD133、CD34免疫组化表达和HE染色血管密度的变化,研究血管内皮细胞对大鼠急性胰腺炎微循环的改善作用。方法:1.细胞分离培养和鉴定:选取成年健康SD大鼠,取大鼠股骨、胫骨,PBS液冲洗骨髓腔,收集全部骨髓细胞,制成单核细胞悬液,加入到淋巴细胞分离液中,用密度梯度离心法离心,取中间白膜层的有核细胞,离心洗涤三次。利用差速贴壁法,取培养48h后未贴壁细胞,用含10%的胎牛血清、5ng/ml bFGF、20ng/ml VEGF的M199培养液培养于6孔板中。培养10d后,免疫组化法和荧光双染法鉴定细胞。待细胞增殖到移植所需的数量时,收集细胞,无血清培养基洗涤两次,用无血清培养基制成单细胞悬液,以备移植。2、大鼠急性胰腺炎模型的建立和EPCs的移植:将72只健康成年雄性大鼠随机分为正常对照组(A组,n=24),急性胰腺炎模型组(B组,n=24),急性胰腺炎内皮祖细胞移植组(C组,n=24)。将SD大鼠用1%戊巴比妥钠0.6ml/100g腹腔注射,于胰腺被膜下注射1%牛磺胆酸钠1ml(正常对照组被膜下注射同等量生理盐水),同时行空肠造瘘,术后均给予肠外营养。C组通过大鼠颈外静脉置管注射经体外培养的内皮祖细胞。各组于C组移植后第3d、7d、14d三个时间点各取6只大鼠处死并收集胰腺标本甲醛固定,胰腺组织HE染色后光镜病理学检查,观察胰腺病理形态变化,记录血管密度情况;免疫组织化学法(SP法)检测胰腺组织中CD133、CD34的累积光密度值(IOD值)。以上所收集的数据采用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS17.0统计软件进行统计学处理;样本均数的比较采用单因素方差分析;两者的相关性采用直线相关和直线回归分析,P<0.05,则差异有统计学意义。结果:(1)B组(模型组)和C组(移植组)的病理评分在3d、7d、14d各时间点高于A(对照组)组(P<0.05)。B组的病理评分在7d、14d点高于C组(P<0.05)。(2)C组胰腺组织HE染色随机选取镜下微血管数在7d、14d高于A组(P<0.05),C组微血管数7d、14d高于B组(P<0.05)。(3)C组胰腺组织CD133的IOD值在各时间点均高于A、B组(P<0.05)。(4)C组胰腺组织CD34的IOD值在各时间点均高于A、B组(P<0.05)。(5)胰腺组织病理评分与CD133的IOD值呈直线相关(r=0.814,P=0.000)。结论:(1)通过密度梯度离心结合差速贴壁法能够从大鼠骨髓分离并培养得到的EPCs可以用于细胞移植。(2)培养的血管内皮祖细胞可通过成功移植到急性胰腺炎的大鼠胰腺组织中。(3)移植的内皮祖细胞能增加急性胰腺炎胰腺微血管的生成,从而使胰腺微循环障碍得到改善。
其他文献
安全防御在徽州传统村落历史营建中占有重要地位,深刻地影响到村落的规划、建设和管理,形成了村落科学的选址、空间布局与营造模式。然而,在时代变迁的背景下,徽州传统村落安
目的:一氧化碳(Carbon monoxide,CO)是一种无色、无味、无刺激性的气体,是有机化合物燃烧后所产生的一种副产品。大气中的CO浓度一般低于0.001﹪,CO与血红蛋白的亲和力是氧气与血红
目的:应用重组人脑利钠肽(recombinant human brain natriuretic peptide,rhBNP)对内毒素性急性肺损伤犬进行干预,从氧化-抗氧化角度说明其对肺脏具有保护作用。方法:1、急性肺损伤
简述江苏省蔬菜产业发展现状及存在的主要问题,分析推进江苏省蔬菜产业绿色发展的必要性和优势,分别从资源高效利用、连作障碍防控、产品品质提升、人才队伍建设、一二三产业
攻与守是作战过程中一对最基本的矛盾,防御理论在中国传统兵学中占据着十分重要的地位,是其必要的组成部分。防御理论的形成和成熟,相对滞后于进攻理论。它萌芽于春秋时期,形
皎然,唐诗僧,字清昼,本姓谢,为南朝宋谢灵运十世孙,浙江湖州人。曾与颜真卿等唱和往还,诗多送别酬答之作,部分篇什宣扬佛教出世思想,情调闲适,语言简淡,有《皎然集》(即杼山
【正】 1980年津巴布韦独立,罗伯特&#183;穆加贝出任总理,1987年就任总统。上任12年来,津巴布韦政局稳定、民族和解、经济上有所发展。1986年曾当选为不结盟运动(截至1989年
2015年10月,党的十八届五中全会提出了绿色发展理念,更加注重经济与生态环境的协调发展。当前,我国乡域地区的环境问题突出,特别是一些工业企业比较集中的乡域地区尤为严重,
介绍南京2015年度16个国际登录梅花新品种的观赏特性,探讨其园林应用与花果兼用,并提出今后特别要加强用于梅果品加工的花果兼用梅花新品种的选育,旨在为国内集游赏、产业为
2006-11—2007-03,我们应用中药免煎颗粒止嗽散治疗急性支管炎32例,与传统中药汤剂止嗽散治疗32例对照观察,现报告如下。1资料与方法1.1一般资料全部64例均为本院门诊患者,随