近年来，大肠癌在全球以及我国的发达地区的发病率呈逐年上升趋势，提高治疗效果、延长生存时间是目前急需解决的问题。与此同时，新的治疗方法和药物也在不断问世，分子靶向药物是发展最快的一个方向，特别是单克隆抗体与传统的化疗药物的联合已经使得晚期大肠癌患者的生存期超过了24个月。小分子靶向药物在大肠癌方面的应用也在不断探索之中，其较低的毒性和靶向的特异性引起广泛的关注，而表皮生长因子受体(EGFR)的靶向抑制剂就是其中之一。 众多的研究表明，EGFR过度表达与恶性肿瘤的发生、发展有着密切的关系，作为EGFR抑制剂之一的吉非替尼也就应运而生，并在治疗非小细胞肺癌方面取得了较好的效果。进一步的研究发现，吉非替尼在非小细胞肺癌患者中的疗效与EGFR外显子突变有密切关系，使得检测EGFR外显子突变成为预测吉非替尼疗效的手段之一。因此，检测大肠癌EGFR外显子突变也为将吉非替尼疗应用于大肠癌提供理论依据。K-Ras基因是EGFR信号转导通路下游的一个基因，它的突变使得细胞不需要EGFR信号转导而直接激活下游的激酶系统，是大肠癌肿瘤形成的多种机制之一，并导致对EGFR的单克隆抗体的耐药，因此，探索EGFR外显子和K-Ras基因突变将为大肠癌分子靶向治疗提供理论依据。 目的 绘制中国人大肠癌EGFR外显子及K-Ras基因的突变谱，为基因靶向药物设计、临床疗效预测等提供依据。 方法 取2004年1月至2006年3月经复旦大学附属肿瘤医院手术治疗的39例结直肠腺癌患者的石蜡包埋标本，每例切取10h厚的组织，经过DNA提取、PCR扩增及产物纯化、基因测序等步骤对EGFR基因的18-21号外显子及K-Ras基因的12，13及61号编码子的突变情况进行测定。同时对39例患者进行生存随访，使用SPSS 12.0的统计软件进行各种统计分析。 结果 (1)所有39例大肠癌组织中共有15例存在EGFR第19号外显子的缺失突变，突变率为38.5％，均为第2238-2255位核苷酸缺失(2例为纯合型突变，其余均为杂合型突变)。 (2)检测EGFR第20号外显子第2607位核苷酸的多态性发现：野生型(从型)占74.4％，而杂合型(AG型)占25.6％，无突变型。 (3)未检测到EGFR第18及21号外显子突变。 (4)共有12例存在K--Ras基因第12号编码子突变，均为替代型错义突变，突变率为30.8％。 (5)单因素分析发现病理分化程度与K-Ras基因突变有关(P=0.021)，多因素分析未发现与K-Ras突变有关的临床病理学因素；而单因素和多因素分析均未发现与EGFR基因突变有关的临床病理学因素。 (6)中位随访时间为26.5个月，单因素分析未发现EGFR基因突变或K-Ras基因突变与患者的总生存时间有关，而多因素分析发现EGFR突变与总生存时间有明显相关性(P=0.027)。 结论 (1)中国人大肠癌EGFR基因的突变率明显高于欧美国家，以19号外显子的第2238-2255位核苷酸缺失为主。 (2)大肠癌EGFR外显子突变与吉非替尼疗效的关系尚不明确，有待进一步研究证实。 (3)中国人大肠癌K-Ras基因的突变率与欧美国家相似，以12号编码子的替代突变为主。 (4)病理分化程度是唯一与K-Ras基因突变有关的因素：分化越差，K-Ras基因第12号编码子突变的可能性越大。 (5)EGFR基因第19号外显子突变是一个独立的预后因素，而K-Ras基因第12号编码子突变与预后无显著相关性。