【摘 要】
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背景与目的:钙化性主动脉瓣疾病是老年患者中最主要的心脏瓣膜病。瓣膜间质细胞(VICs)在瓣膜钙化的过程中扮演了重要的角色。白介素18(IL-18)在狭窄的主动脉瓣中高表达并且其
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背景与目的:钙化性主动脉瓣疾病是老年患者中最主要的心脏瓣膜病。瓣膜间质细胞(VICs)在瓣膜钙化的过程中扮演了重要的角色。白介素18(IL-18)在狭窄的主动脉瓣中高表达并且其表达与瓣膜狭窄的程度呈正相关。但IL-18在主动脉瓣钙化中的作用尚未可知。本研究通过体外分离并培养VICs,同时检测IL-18是否能够促进VICs向肌成纤维细胞和/或成骨细胞转分化。材料与方法:采用胶原酶消化法从新鲜猪主动脉瓣中分离猪主动脉瓣间质细胞(PVICs)并通过免疫荧光染色鉴定细胞。采用成骨诱导培养基或正常标准培养基培养VICs并进行碱性磷酸酶(ALP)染色。采用IL-18干预VICs,分别检测成肌与成骨分化标志物的基因与蛋白表达,同时检测核因子κB的磷酸化表达以及ALP活性以及染色。结果:采用胶原酶消化法能够成功地从主动脉瓣膜中分离出VICs。免疫荧光检测发现VICs平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)以及波形蛋白染色阳性,而CD31染色阴性。钙化诱导培养基培养三周发现实验组ALP活性较对照组显著增强。我们的研究发现采用IL-18干预PVICs能够显著提高α-SMA基因以及蛋白的表达。同时,IL-18干预能够促进OPN以及Runx2 m RNA的表达,但无法促进OPN以及Runx2蛋白的表达。IL-18在钙化诱导培养基中能够诱导ALP活性上调。同时IL-18显著刺激VICs中NF-κB p65的磷酸化表达。结论:IL-18能够促进VICs向肌成纤维细胞转分化,在钙化条件培养中。IL-18能够加速VICs的钙化,同时这些作用可能是通过NF-κB相关通路的激活实现的。
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