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缺血性脑血管病(ischemic cerebrovascular disease, ICVD)因其较高的发病率、死亡率和致残率成为人类健康的杀手,目前只有溶栓治疗、抗血小板治疗和抗凝治疗是有效的方法。溶栓治疗后血管再通会发生再灌注损伤,大脑缺血再灌注损伤是个复杂的病理生理过程,而炎症反应在大脑缺血后二次损伤过程中发挥重要作用。核转录因子-κB (nuclear factor kappa B, NF-κB)是多种炎症介质的关键调节蛋白,其中发挥主要生理功能的是其中两个亚基蛋白p50与p65,两者构成二聚体。NF-κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB, IκB)的磷酸化降解是NF-KB激活的主要途径。NF-κB激活路径中信号系统研究为阻断复杂的炎症和细胞凋亡机制提供潜在的分子靶点。米诺环素(Minocycline, MC)是一种半合成的第二代四环素衍生物,容易透过血脑屏障到达中枢神经系统。1998年Yrjanheikki首次报导MC在脑缺血中有神经保护作用,但其机制尚未完全明晰。本实验通过观察应用米诺环素干预对大鼠脑缺血再灌注后IκBα、NF-κB P65、TNF-α表达变化以及48h脑组织病理变化和神经元细胞凋亡的影响,探讨其脑保护作用的可能机制。材料与方法采用健康成年Sprague-Dawley大鼠72只,随机分为假手术组(Sham)、脑缺血再灌注模型组(IR组)、米诺环素治疗组(MT组),各组24只。每组大鼠再按缺血再灌注后6、12、24、48小时不同观察时间点随机分为4个亚组,每个亚组6只。参照Longa的大鼠大脑中动脉内栓线阻断法(MCAO)适当改良后进行,建立大脑中动脉阻塞再灌注模型。假手术组除不插线外,余步骤同其它两组。模型成功后MT组大鼠于再灌注时给予米诺环素灌胃,首次用量45mg/kg,此后每12h灌胃一次22.5mg/kg, Sham组及IR组均在相同时间点给予等量生理盐水处理,直至处死。采用苏木素-伊红(HE)染色检测缺血再灌注48h脑组织病理学改变;TUNEL细胞凋亡原位检测技术检测缺血再灌注后梗死侧皮质48h凋亡的神经细胞以评价缺血再灌注对神经细胞的损伤情况以及米诺环素的神经保护作用；SP免疫组化染色方法检测IKBα、NF-κB P65、TNF-α蛋白的表达,观察各时间点的变化情况和应用米诺环素治疗的影响。结果(1)再灌注后48h MT组海马CA1区组织病理改变较IR组明显减轻；(2)再灌注后48hIR组与Sham组相比TUNEL阳性细胞数显著增多(P<0.01),MT组与IR组相比,TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.05)；(3)NF-κB P65于脑缺血再灌注6h即明显升高,24h表达最高,48h表达稍有降低；TNF-α于脑缺血再灌注6h即明显升高,24h表达最高,48h仍维持高表达水平；与同时间点Sham组相比,IR组海马CA1区NF-κB P65、TNF-α阳性细胞数显著增多(P<0.01)；与同时间点IR组相比,MT组海马CA1区NF-κBP65、TNF-α阳性细胞数明显减少(P<0.05)；(4) IκBα光密度值IR组IκBα表达12h最低,24h开始渐有恢复；相应时间点MT组较Sham组明显降低(P<0.01),较IR组明显增高(P<0.05)。结论(1)大鼠脑缺血再灌注损伤后IκBα表达降低,NF-κB过度激活表达。(2)米诺环素可以增加大鼠脑缺血再灌注后脑组织IκBα表达,减少NF-κB的核内阳性表达,减少TNF-α的阳性表达,从而部分地阻断脑缺血再灌注后炎症级联反应,减少神经细胞凋亡,发挥脑保护作用。