单纯疱疹病毒(herpes simplex virus, HSV)分为单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)两种类型,可以感染皮肤、黏膜以及多种器官。绝大多数生殖器疱疹(genital herpes,GH)是由HSV-2感染引起,但由HSV-1感染引起的GH比例在增加。HSV-2感染目前是不可治愈的,主要通过性接触水平传播和母婴垂直传播,传染性极强且会反复发作,疱疹发作产生的溃疡是生殖器溃疡的主要病因之一,流行病学证据表明HSV-2感染与宫颈癌和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染都有密切的关系。HSV-2在人群中有着很高的感染率和发病率,世界卫生组织发布的调查数据显示2003年全球15岁至49岁年龄段人群中,HSV-2感染率约为16.2%,发病率约为0.7%,并且都有不断上升的趋势。因此,建立一种简便、快速、低成本的HSV-2初筛方法,对GH的辅助诊断和控制传播具有重要的意义。为探索本实验室前期筛选到的特异性抗HSV-2糖蛋白B的单链抗体在GH诊断中的实用价值,本研究将该单链抗体基因克隆入原核表达载体pLac-duet-1-AKP中构建了抗HSV-2单链抗体和碱性磷酸酶的融合表达载体pLac-H3-AKP,并转入大肠杆菌BL21(DE3)获得表达,经IPTG诱导后SDS-PAGE显示在破菌沉淀中有符合预期大小的约75kD大小的新生蛋白带。将包涵体裂解后用镍离子螯合层析纯化变性的融合蛋白,并初步探索出该融合蛋白的最佳复性条件：复性缓冲液(50mmol/L Tris-HCl,0.5mol/L NaCl,10mmol/L β-巯基乙醇,0.5mol/L尿素,0.5mol/L精氨酸,lmmol/L GSSG和3mmol/L GSH,pH7.5),蛋白的初始复性浓度为0.13mg/mL,4℃复性24h。复性后的融合蛋白不仅能与HSV-2糖蛋白B抗原特异结合而且具有碱性磷酸酶的指示酶活性,为快速检测HSV-2抗原提供了一种有效的方法。