随着社会经济和工业的快速发展,土壤重金属污染问题日益严重。重金属多具强迁移性、强致毒性和长半衰期等特点,除直接被植物吸收,影响植株生长发育外,还可通过渗入地下水、进入食物链等方式危害人类健康。植物修复是一种高效、经济、环保的技术,主要利用绿色植物对重金属的吸收和转移,富集到植株的地上部分,再通过后续处理实现对污染土壤的修复。东南景天是在我国发现的锌/镉超富集植物,其超富集和耐受重金属的机制尚不清楚。本文利用酿酒酵母筛选超富集型东南景天的cDNA文库,以期获得能够耐受镉的相关基因,为进一步阐明超富集植物东南景天耐受镉的机制提供基础。在含有40μM至140 μM不同浓度镉(Cd)的固体培养基上,发现转化空载体酿酒酵母的生长在含120μMCd的固体培养基上会受到显著抑制。以120μM Cd作为后续文库筛选的条件,用酿酒酵母筛选cDNA文库。共获得291个耐受镉的转基因酵母。经质粒提取和测序比对,发现增强酵母耐受Cd的基因主要编码植物络合素合酶、核糖体蛋白、转录调控因子以及与氧化还原、光合作用、呼吸作用相关的功能蛋白,其中59个蛋白功能未知。X8-1、X152-1、X200-5基因分别编码铁氧还蛋白、膜联蛋白和14-3-3蛋白,可显著增强酿酒酵母对镉的耐受性。X8-1基因在超富集植物东南景天根、茎、叶中均有表达,且在50μMCd处理后,该基因在超富集植物东南景天叶片中的表达量上调。X8-1基因在非富集型东南景天根、茎、叶中的表达量显著低于超富集型东南景天,且表达量不受镉胁迫影响。X152-1和X200-5基因在两种不同生态型东南景天根、茎、叶中的表达量相似,且不受镉胁迫的影响。利用TAIL-PCR技术对这三个基因进行全长的克隆并重新命名。获得SaFd基因987bp,SaAnn基因2190bp,14-3-3蛋白基因2175bp。同时构建了SaFd基因的超表达质粒和用于研究亚细胞定位的重组质粒,为进一步研究该基因的功能提供帮助。