骨折愈合是经过一个复杂的生理过程，并且有很多的生长因子表达水平的变化。近年来，随着研究的逐步深入，不断地发现神经营养因子在骨折愈合过程中的重要作用。骨髓间充质干细胞（BMSCs）是骨髓内除了造血干细胞之外的一类具有多向分化潜能的成体干细胞，在一定诱导条件下，具有向成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、脂肪细胞、心肌细胞等多向分化的能力。BMSCs已经在众多临床前期实验中被用于修复各种组织损伤。已有研究表明，骨折治疗中，导入NGF-BMSC，不仅能诱导BMSC向成骨细胞转变，它分泌的NGF还能加速骨折愈合，从而达到更理想的效果。本实验以骨髓间充质干细胞为研究材料，以神经营养因子BDNF修饰BMSCs细胞，进一步探讨BDNF在成骨细胞诱导分化及骨折愈合修复过程中的重要作用。本论文采用双酶切法切取大鼠神经生长因子BDNF基因序列，酶切后和载体pECFP-C1相连接，构建了绿色荧光蛋白标记的神经生长因子基因真核表达载体pECFP-C1-BDNF。采用Percoll分离法在体外培养及扩增BMSCs。采用神经因子bFGF及EGF共同诱导BMSCs向神经样细胞分化。将重组质粒pECFP-C1-BDNF通过脂质体转染BMSCs。通过Western blotting检测转染效果。使用地塞米松的诱导方案将转染质粒的BMSCs向成骨细胞诱导，研究BDNF修饰的BMSCs在成骨细胞分化过程中的作用。本实验成功构建了真核表达质粒pECFP-C1-BDNF。在研究中发现，转染pECFP-C1-BDNF质粒可以有效的在BMSCs内表达BDNF蛋白，并且加速BMSCs向成骨细胞的诱导分化的进程，有利于BMSCs在骨损伤部位分化为成骨细胞，促进骨折愈合，对骨折后损伤部位的组织修复等具有重要的作用。本研究对BDNF基因修饰型细胞移植治疗临床疾病提供了一条有效、安全的新的发展方向。