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第一部分目的:探讨notch1、c-myc及p21蛋白在乳腺癌组织中的表达情况及其与临床病理的关系,分析其在乳腺癌发生发展中的作用,为乳腺癌临床药物治疗提供理论依据。方法:采用免疫组化S-P法检测notch1、c-myc及p21蛋白在60例乳腺癌组织和18例乳腺良性病变组织中的表达,分析它们的表达情况与患者临床病理的关系以及notch1、c-myc和p21蛋白表达的相关性。结果:notch1、c-myc和p21蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为45.00%(27/60)、60.00%(36/60)和58.33%(35/60),与乳腺良性病变组织的阳性表达率11.11%(2/18)、22.22%(4/18)、27.78%(5/18)相比有非常显著差异(P<0.01)。其中,notch1蛋白表达强度与乳腺癌的病理分级呈显著相关性(P<0.05),与淋巴结转移呈非常显著相关(P<0.01),与年龄及肿瘤的大小无关;c-myc蛋白与乳腺癌病理分级、年龄、肿瘤大小及淋巴结转移均无明显相关性;p21蛋白与淋巴结转移呈显著负相关性(P<0.05),与病理分级、年龄及肿瘤大小无关。notch1与c-myc蛋白在乳腺癌中的表达呈非常显著的相关性(P<0.01)。结论:notch1、c-myc及p21蛋白在乳腺癌组织中的的阳性表达均高于在乳腺良性病变组织中的表达,提示三者在乳腺癌发生发展过程中发挥一定的作用。notch1蛋白的表达与乳腺癌病理分级呈显著的相关性,与淋巴结转移亦呈非常显著相关性,表明notch1蛋白的表达可能与乳腺癌的恶性程度相关,对乳腺癌患者预后的判断有一定的帮助。第二部分目的:观察冬凌草甲素(Oridonin,Ori)对乳腺癌Bcap-37细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法:四氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法观察Ori对乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响;相差显微镜、Hoechst33258荧光染色观察Ori作用前后Bcap-37细胞的形态学变化;流式细胞仪检测Ori对Bcap-37细胞周期的影响;RT-PCR检测Ori作用前后Bcap-37细胞中notch1、c-myc、p21、cdc2及cyclinB1 mRNA表达的变化。结果:Ori对乳腺癌Bcap-37细胞的生长增殖有明显抑制作用,呈浓度和时间依赖性。相差显微镜观察给药后Bcap-37细胞形态发生明显变形。Hoechst33258荧光染色观察到给药后部分细胞出现胞核染色质不均,呈颗粒状荧光等凋亡特征性改变。流式细胞仪检测显示给药后细胞被阻滞在G2/M期,其中20μmol/L浓度组变化最明显。RT-PCR分析显示,Ori作用后Bcap-37细胞中p21mRNA表达水平上调,cyclinB1、cdc2、c-myc及notch1 mRNA表达水平下调。结论:冬凌草甲素可显著抑制乳腺癌Bcap-37细胞的增殖,诱导Bcap-37细胞发生G2/M期阻滞、凋亡和坏死,周期阻滞作用可能与抑制notch1信号通路有关。