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第一部分氧诱导视网膜病变(Oxygen-induced retinopathy,OIR)模型视网膜的形态学研究目的:建立OIR大鼠模型,观察OIR模型鼠的视网膜形态学和超微结构改变,为研究早产儿视网膜病变(Retinopathy of prematurity,ROP)的发病机制提供理论基础。方法:将出生后7天的Evans大鼠,随机分为正常对照组、OIR组,将OIR组大鼠置于密闭的有机玻璃容器中,100%湿医用氧吸入0.75升/分钟。5天后置于正常环境,在出生后的12、14和17天取材。用HE染色观察视网膜的形态学改变,电子显微镜观察超微结构的变化。ADP酶免疫化学法观察血管形态和分布。结果:正常对照组视网膜各层排列整齐,无或极少有血管内皮细胞突破视网膜内界膜,细胞排列规则;视网膜血管基本成熟,分布良好,可见分支血管。外节线粒体细长。OIR组视网膜神经节细胞层结构紊乱,间隙增宽,可见空泡,内、外核层细胞核减少,外节线粒体变短。大量血管内皮细胞突破视网膜内界膜,形成管腔。视网膜大血管进一步向外生长,可见大量新生血管,密度增加且分布无序。结论:缺氧诱发了鼠视网膜形态学以及血管形态、分布的改变。第二部分Apelin-13抑制OIR模型鼠视网膜的小胶质细胞的活化和增殖目的:研究Apelin-13对OIR模型鼠视网膜小胶质细胞的影响。方法:将动物分为三组,正常对照组、OIR+vehicle组和OIR+Apelin组。OIR+Apelin组和OIR+vehicle组分别接受玻璃体腔注射等体积的Apelin-13和空白对照。分别用免疫组化法检测小胶质细胞形态及细胞数量。用RT-q PCR和Western-blot检测CD11b和IBA-1的mRNA含量及蛋白表达。结果:OIR组出现大量阿米巴样小胶质细胞,而正常对照组和OIR+Apelin组以分枝状小胶质细胞为主,CD11b和IBA-1的mRNA和蛋白表达低于OIR+vehicle组。正常对照组与OIR+Apelin组比较差异不显著。结论:Apelin-13抑制了OIR模型鼠视网膜中小胶质细胞的活化和增殖,降低了CDllb和IBA-1的mRNA含量和蛋白表达。第三部分Apelin-13保护OIR模型鼠血-视网膜屏障目的:研究Apelin-13对OIR鼠视网膜血管通透性及TNF-α和i NOS mRNA含量及蛋白表达的影响。方法:将动物分为三组,正常对照组、OIR+vehicle组和OIR+Apelin组。OIR+Apelin组和OIR+vehicle组分别接受玻璃体腔注射等体积的Apelin-13和空白对照,用伊凡思蓝染色检测视网膜血管的通透性,用RTqPCR和Western-blot检测TNF-α和iNOS的mRNA含量及蛋白表达。结果:OIR+vehicle组与正常对照组相比,视网膜血管的通透性增强,TNF-α和iNOS的mRNA含量及蛋白表达上调;OIR+Apelin组与OIR+vehicle组相比,视网膜血管的通透性降低,TNF-α和iNOS的mRNA含量及蛋白表达下调。OIR+Apelin组与正常对照组无显著性差异。结论:玻璃体腔注射Apelin-13可以保护OIR模型鼠的血-视网膜屏障、降低TNF-α和iNOS的mRNA含量及蛋白表达。