Pre-microRNA末端环内的SNP影响结直肠癌发生的机制研究

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第一部分Pre-micro RNA末端环内SNP与结直肠癌发生的相关性研究【目的】研究micro RNA前体的末端环内SNP与结直肠癌易感性和临床病理参数之间的相关性。【方法】1、筛选位于pre-mi RNA末端环内的SNPs,筛选其中MAF≥0.1的作为候选SNPs;2、收集1026例结直肠癌病人和1026例对照组的外周血样,从中提取DNA;3、采用Mass ARRAY SNP基因分型平台高通量质谱分型;4、统计分析SNP基因型与结直肠癌发病率和临床病理参数之间的关系。【结果】1、在mi RNASNP 2.0数据库中共找到121个位于pre-mi RNA末端环的SNPs,其中17个SNPs的MAF≥0.1。2、高通量质谱分型平台成功测出样本中7个SNPs位点的基因型。3、统计结果发现,rs7911488与结直肠癌发病显著相关,C等位基因型是肠癌发生的危险因子。4、该位点与肿瘤最大直径相关。【结论】rs7911488与结直肠癌发生发展显著相关,C等位基因型是肠癌发生的危险因子。第二部分mi RSNP rs7911488对mi RNA及其调控作用的影响【目的】探索rs7911488影响结直肠癌发生的机制。【方法】1、测定肠癌组织样本的rs7911488位点基因型和mi R-1307表达水平;2、软件预测可能与pre-mi R-1307结合的蛋白,并验证rs7911488对结合蛋白的影响;3、软件预测并验证mi R-1307的下游靶基因。【结果】1、肠癌组织中mi R-1307低表达,与rs7911488位点的C等位基因型相关。2、MBNL1可与C基因型的pre-mi R-1307结合,导致DICER1无法与之结合,导致mi R-1307表达下调。3、抗凋亡蛋白Bcl2是mi R-1307的直接靶基因,mi R-1307的低表达导致Bcl2表达上调,个体患结直肠癌风险上升。【结论】rs7911488 C等位基因型pre-mi R-1307与MBNL1结合,影响了DICER1的正常作用,使得成熟mi R-1307表达量下降,从而导致Bcl2表达上调,个体患结直肠癌风险上升。
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