通过构建香蕉果实的SSH(抑制差减杂交)文库,本实验室已经获得了7个几丁质酶基因的片段。又通过芯片的分析结果表明其可能与果实成熟相关,因此有必要对其进一步的研究.序列比对发现,7个SSH片段分别属于两个不同的基因,其中一个基因为三类酸性几丁质酶基因,命名为基因A,另外一个为未知基因B。根据已知的基因A序列来设计引物,从香蕉果实cDNA文库中扩出基因A。根据已知的SSH片段RB-196来设计引物,从香蕉果实cDNA文库中筛选出一条长为1051bp的片段,Blastx比对后发现其与另外一几丁质酶基因的同源性很高,含有完整的阅读框,编码317个氨基酸。本研究旨在分析两个几丁质酶与采后香蕉果实成熟的关系,首先测定了采后正常成熟的香蕉果实(对照)、1-MCP(1-甲基-环丙烯)处理、乙烯利处理果实的果肉和果皮的内切和外切几丁质酶活性。结果表明1-MCP处理的酶活在第12天开始明显提高,第25天达到最高峰,与无处理果实相比其几丁质酶活性峰延迟了4天,酶活性也明显降低。乙烯利处理的酶活在第2天开始明显提高,第6天达到最高峰,与无处理果实相比其几丁质酶活性峰提前了13天,酶活性也较高。然后根据其酶活性的变化趋势,选取了1-MCP处理及对照采后2天、10天、14天、19天、21天、23天、25天和1-MCP处理27天、乙烯利处理的2天、4天、6天、8天、10天果实果肉作为表达分析的材料,提取各自的RNA并反转录成cDNA为的模板来做RT-PCR。结果表明在采后香蕉不同处理果实在各成熟期的表达有差异,从采后到第2天一直都是呈上升的趋势,到了第21-25天表达量最高(乙烯利处理的第6天),然后迅速下降。这与几丁质酶活性变化的曲线具有一致性,因而进一步说明这两个几丁质酶基因与香蕉采后果实的成熟相关。