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目的探讨miRNA-122、-192、-193、-125b、-106b表达及miRNA-122、-125b、-106b甲基化与异烟肼(isoniazid,INH)致大鼠肝损伤的关系;阐明miRNA-122、-125b、-106b参与INH致肝损伤的发生机制。方法将104只SD大鼠随机分为空白组(8只)、实验组(48只)和平行对照组(48只)。实验组与平行对照组各设3d、7d、10d、14d、21d、28d时间组,每组8只。实验组给予异烟肼55 mg·kg-1·d-1连续灌胃,平行对照组给予等容积蒸馏水,各时间点处死各组所有大鼠,保存血浆和肝组织。肝组织经HE染色观察病理改变;测定血浆ALT、AST活性;RT-PCR检测miRNA、mRNA表达;qMSP检测miRNA甲基化水平;ELISA分析相关蛋白含量。结果1肝组织病理和血浆ALT、AST水平分别在给药7d、10d发生明显改变,提示肝损伤造模成功。2与空白组及平行对照组比较,随着给药时间延长,大鼠肝组织中miRNA-122、-192、-125b、-106b表达水平逐渐下降,分别在第14d、14d、21d、21d达到低谷,而miRNA-193表达则呈上升趋势,第21d达峰值,析因分析显示,给药与否和不同给药时间组的差异均有统计学意义,且两因素间存在交互效应(均P<0.05)。3与空白组及平行对照组比较,随着给药时间延长,大鼠肝组织中miRNA-122、-125b、-106b甲基化水平呈上升趋势,给药与否和不同给药时间组的差异也均有统计学意义,且两因素间也存在交互效应(均P<0.05)。4miRNA-122的上游pri-miR-122及HNF-4α、C/EBPα基因mRNA于给药第3d呈现低表达,并随着给药时间而降低,而其下游的Cycling G1、CAT-1基因mRNA及蛋白表达则随着给药时间延长而上升(均P<0.05),且给药与否和不同给药时间组间存在交互效应(均P<0.05)。5 miRNA-106b、-125b共同作用的下游MAPK14、STAT3基因mRNA表达随着给药时间延长呈高表达,分别在第21d和14d达峰值。STAT3蛋白与其mRNA、STAT3的磷酸化蛋白p-STAT3以及pSTAT3调控的下游RORγt mRNA等4个指标的表达同步上升,但MAPK14表达却呈下降趋势。同时,RORγt调控的下游炎症因子IL-17、IL-6、TNF-α的mRNA和蛋白以及IL-17调控的CXCL1、MIP-2因子mRNA和蛋白均随着给药时间的延长而呈高表达。上述因子在给药与否和不同给药时间组间均存在交互效应(均P<0.05)。6在给药的第3天,大鼠肝组织中检出miRNA-122、-192、-125b、-106b表达水平的显著改变,明显早于血浆ALT、AST变化(第10d),且两类指标间存在负相关(均P<0.05)。7在给药的第7天,大鼠肝组织中检出miRNA-122、-125b、-106b甲基化水平的显著改变,早于血浆ALT、AST变化(第10d),且两类指标间存在正相关(均P<0.05)。结论1肝组织中miRNA-122、-192、-125b、-106b的低表达与INH致大鼠肝损伤有关系。2肝组织中miRNA-122、-125b、-106b启动子区CpG岛的高甲基化与INH致大鼠肝损伤有关系。3转录因子HNF-4α、C/EBPα调控miRNA-122低表达并进一步调控靶基因Cycling G1、CAT-1参与肝损伤的发生过程,而低表达miRNA-125b、-106b则通过靶向STAT3调控炎症因子IL-17、IL-6、TNFα分泌参与肝损伤的发生。