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目的:探讨氯化锂(Lithium chloride,LiCL)与胶质细胞系源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对1-甲基4-苯基1,2,3,6四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)损伤昆明(KM)小鼠中脑黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元早期保护作用。
方法:实验分两部分。第一部分:利用MPTP制备成年KM小鼠PD模型,单侧纹状体立体定位注射GDNF或者PBS,一部分取中脑黑质节段,做连续冠状石蜡切片,结合免疫组织化学染色方法,观察各组酪氨酸羟化酶(tyFOSine hydroxylase,TH)、钙结合蛋白(CalbindinD28k,CB)的表达,光镜观察并细胞计数,统计学分析;另一部分取中脑黑质组织匀浆,行TH、CB的Western blot检测,用LabWorks软件分析处理。第二部分:同样利用MPTP制备成年KM小鼠PD模型,分实验组,腹腔注射氯化锂;对照组,腹腔注射PBS。在动物存活一周后,一部分取中脑黑质节段,固定、包埋做连续冠状石蜡切片,以免疫组织化学染色方法,显示各组TH和CB表达阳性细胞,光镜观察并细胞计数,统计学分析;另一部分取中脑黑质组织匀浆,行TH、CB的Western blot检测,用LabWorks软件分析。
结果:(1)免疫组织化学染色结果显示GDNF组KM小鼠黑质致密部TH与CB阳性神经元数量显著多于注射PBS组(P<0.01)。Western blot免疫印迹结果显示GDNF组的TH、CB蛋白含量表达水平显著多于注射PBS组(P<0.05)。(2)免疫组织化学染色结果显示实验组小鼠黑质致密部TH与CB阳性神经元数量显著多于对照组(P<0.01),Western blot免疫印迹结果显示LicL组的TH、CB蛋白含量表达水平显著多于对照组(P<0.05)。
结论:(1)GDNF对成年PDKM小鼠黑质DA能神经元具有保护作用,且这种保护作用可能与TH、细胞内CB表达增加有关。(2)氯化锂对成年PD KM小鼠黑质DA能神经元具有保护作用,且这种保护作用可能与TH、细胞内CB表达增加有关。