补肾活血方治疗绝经后骨关节炎的实验研究

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研究目的:通过动物实验,探讨补肾活血方防治绝经后骨关节炎的作用机制。研究方法:实验大鼠196只,随机分为6组,记为中药组(A组)、扶他林组(B组)、模型组(C组)、交叉韧带切断组(D组)、正常空白组(E组)、去势组(F组)。A组、B组、C组每组48只,A组大鼠分成三组,每组16只,分别记为A1组、A2组、A3组,分三次取材用,每组再分成2小组,每小组8只,分两笼饲养,每笼4只,记为A1.1、A1.2、A2.1、A2.2、A3.1、A3.2,其中每次取材一小组8只大鼠胫骨用于骨组织形态计量学检测,另外一小组8只大鼠胫骨用于一般病理学观察及Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化测定,B组、C组标记方法及分组同A组;D组大鼠30只、随机分成三组,每组10只,记为D1组、D2组、D3组、分三次取材用,每组再分成2小组,记为D1.1、D1.2、D2.1、D2.2、D3.1、D3.2,其中一小组3只大鼠、另外一小组7只大鼠,两小组用途同A组;E组大鼠14只,随机分成2小组,每组7只,只取一次材,用途同A组;F组大鼠8只,随机分成2小组,每小组4只,只取一次材,用途同A组。所有大鼠的右股骨用于骨密度测定,所有大鼠血清用于雌二醇水平的测定。 用10%水合氯醛溶液按0.33ml/100g腹腔注射,5min后,麻醉完全,A组、B组、C组均采用Pernille等的方法切除大鼠双侧卵巢,造成大鼠去势,再于每只大鼠的右膝关节处切开皮肤,在无菌操作下按Mc Devitt等方法切断右侧膝交叉韧带,造成关节不稳,行抽屉试验阳性后彻底止血,逐层缝合,消毒伤口;D组大鼠是将大鼠卵巢从腹腔提出而不切除,仅切除周围少量脂肪组织后立即关闭伤口,再行交叉韧带切断,行抽屉试验阳性后彻底止血,逐层缝合,消毒伤口;E组未予任何干预措施,F组同C组方法背侧入路摘除双侧卵巢,然后在其右膝关节处切开皮肤,不行交叉韧带切断,立即关闭伤口,所有伤口在关闭前均滴入少量的青霉素溶液。术后分笼饲养,连续3日每日给予青霉素溶液4万单位肌注。 补肾活血方由熟地、补骨脂、丹参、黄芪等10味组成。该方的提取药物,含生药量2.99g/ml,(由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供),供灌胃用。扶他林缓释片(75mg/片,北京诺华制药有限公司生产,生产批号:04069),使用前配置成浓度为1.0875mg/ml的混悬液。氯化钠注射液(上海华原股份有限公司生产,产品批号:04110101)。 术后一个半月,绝经后骨关节炎动物模型造模成功,开始灌胃给药治疗,A组按6ml/kg灌服,B组按9.8mg/kg灌服,每日一次,中药和扶他林混悬液使用前充分摇匀,C组、D组、E组、F组均给予生理盐水2ml/只灌胃,每日一次。 研究结果: 血清雌激素:大鼠造模成功后,灌胃后2周,A1组(中药组)、B1组(扶他林组)、
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