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[目的]:利用动物实验,通过免疫学方法定位层粘连蛋白(Laminin,LN)及Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ,colⅢ)在LASEK和PRK手术前后角膜中的表达分布,并通过统计学方法检测它们的表达量,从而探讨屈光手术后ECM的表达与HAZE的关系。[方法]:将30只大鼠随机分为术后1天、2天、1周、2周、4周及正常对照组,共六组。每组5只大鼠(10只眼)。每支大鼠左眼行PRK手术,右眼行LASEK手术。由同一眼科医师对大鼠施行双眼准分子激光手术。分别于术后第1天、第2天、第1周、第2周及第4周用断髓方法处死后立即摘取眼球。科医人公司鹰式世纪波准分子激光机能量密度为120Mj/cm2,激光频率10HZ,脉冲能量220mJ,设计矫正度数-2.00D。切削直径约4.5mm,深度约15um.3%戊巴比妥钠液以1ml/kg腹腔皮下注射以全身麻醉,并予以0.05%爱尔凯因滴眼液点眼局麻后行LASEK和PRK手术。术后两眼均滴典必殊滴眼液,4次/日,氯霉素滴眼液,6次/日,迪可罗眼膏,睡前1次/日,每周两种滴眼液各减一滴。所有标本中均无感染征象。摘取标本后用中性甲醛(PH7.4)固定40C保存24h,,常规石蜡包埋(标本的长轴与石蜡表面垂直),制成约5um石蜡切片。[结果]:1.HE染色结果显示:(1)LASEK组:1d上皮瓣细胞层比邻近区域增厚,上皮层轻度水肿,上皮层基底细胞比未损伤区域体积大,胶原排列基本规则;1w少数上皮基底细胞核深染,较多基底细胞呈空泡样变性,排列较乱,胶原排列轻微紊乱;4w上皮层明显增厚达7-8层细胞,且排列紊乱,多数基底细胞排列不规则,增殖明显,胶原排列紊乱.(2)PRK组:1d未见或仅有1层上皮细胞覆盖切削区,细胞排列轻微紊乱,形态未见明显异常,切削区外上皮层厚度正常,胶原排列基本规则;1w上皮层增厚到4层或5层,上皮细胞体积开始增大,上皮基底细胞出现空泡样变性且排列紊乱,基质细胞数开始增多,胶原排列不规则;4w上皮层继续增厚甚至达9层,切削区比周围区域增厚显著,整个上皮水肿,基底细胞排列不规则,胶原排列很疏松、紊乱,基质细胞增殖明显。2.免疫组化染色法结果:在正常的角膜组织中,LN仅在基底层柱状上皮细胞胞浆、胞间和角膜基质中微量表达,于前弹力层表达,为标志前弹力层的一条“线”。LASEK术后4小时即可观察到微弱的LN显色,且一直持续到术后四周。对于PRK,从术后第二天至术后四周均可见LN表达,且表达逐渐增强。正常角膜中不表达colⅢ,LASEK和PRK都于术后第一周开始表达,持续到术后第四周。但是,LAESK术后四周colⅢ表达的量远远少于PRK.[结论]:1.基底膜的相对完整性,是LASEK与PRK手术区别的关键点,也是LASEK术后HAZE形成较少主要原因.2.正常的角膜中不表达colⅢ,colⅢ的表达与角膜损伤有关.也意味着HAZE的形成。3.在受损角膜的早期修复过程中,LN及colⅢ的表达呈正相关.抗LN增殖可做为临床治疗HAZE形成的靶点.