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蛋白质结合或游离的蛋氨酸(Met)在生物体内氧化应激条件下会发生氧化反应,生成S-型和R-型蛋氨酸亚砜(Met-O)两种异构体,是生物体内普遍存在的一种蛋白质修饰反应,然而生物体中这两种异构体的定量分析缺乏快速有效的方法。高效毛细管电泳(HPCE)是结合传统电泳技术与色谱技术发展起来的一种重要的分离技术,已经成功应用于氨基酸,肽以及药物等手性分析领域。此外,毛细管电泳还具有分离模式可灵活变换,方法开发较为容易,操作费用低等特点。本文采用丹酰氯(DNS-CL)作为衍生试剂,采用胶束毛细管电泳紫外分离分析了蛋白质中蛋氨酸亚砜(Met-O)异构体及其含量。主要研究内容与结果如下:(1)首先对氨基酸混合标准样品中Met-O异构体进行了胶束毛细管电泳分离分析,考察了温度、电压、pH、SDS浓度、β-CD浓度对蛋氨酸亚砜分离及鉴定的影响。结果表明:在分离温度为15℃,电压为20 kV,pH值为9.5,硼砂背景缓冲液浓度为20 mM,SDS浓度为120 mM,β-CD浓度为16 mM时,R,S-Met-O实现基线分离(Rs>1.5),而且可以与其它20种氨基酸基线分离。(2)使用CE-UV对氨基酸混合样品中的Met-O进行了定量分析。当Met-O浓度范围为0μM至300μM时,其线性相关系数为0.99996。进行不同浓度的加样回收实验,加标量为30μM, 60μM和90μM L-Met-O时,回收率分别为113.7±2.9%、109.8±3.8%和102.4±1.5%。(3)考查了牛血清蛋白(BSA)的外源性氧化条件和影响蛋白质的水解因素。采用并优化了离子交换树脂对蛋白质水解液进行脱盐处理步骤和分离条件。在分离温度为15℃,电压为20 kV,硼砂为20 mM(9.5),SDS为120 mM,β-CD为16 mM和5%(v/v)乙腈的分离条件下,蛋白质水解液中R-和S-Met-O异构体可基线分离。采用上述方法检测了氧化后BSA中Met-O的含量,其测定值高于BSA中Met的测定值,其原因有待进一步的分析。