【摘 要】
:
SWEET(sugars will eventually be exported transporters)是一种广泛存在于真核和原核生物中的糖转运蛋白,一般包含7个跨膜螺旋,形成两个Mt N3/saliva结构域。它们在生殖发育、植物的逆境反应及衰老、植物与微生物的相互作用等多个方面起重要作用。研究发现,白菜Br SWEET基因家族中共有34个成员,定位在1至10号染色体上,参与多个生理生化进程
【基金项目】
:
国家重点研发计划子课题(2016YFD0100204-31); 浙江省农业(蔬菜)新品种选育重大科技专项 (2016C02051-6-1); 浙江省科基础公益研究计划项目(LGN18C15003); 江苏省现代农业科技计划项目(BE2018310);
论文部分内容阅读
SWEET(sugars will eventually be exported transporters)是一种广泛存在于真核和原核生物中的糖转运蛋白,一般包含7个跨膜螺旋,形成两个Mt N3/saliva结构域。它们在生殖发育、植物的逆境反应及衰老、植物与微生物的相互作用等多个方面起重要作用。研究发现,白菜Br SWEET基因家族中共有34个成员,定位在1至10号染色体上,参与多个生理生化进程。且病原菌侵染会诱导白菜SWEET转运蛋白的启动,在侵染过程中能提高宿主组织中的糖的运输和调节分配。目前根肿病和菌核病是威胁十字花科农作物的两大病害,二者均能够通过农事活动、流水和土壤等进行传播,且传播速度快,一旦染病便难以根除。由于芸薹根肿菌生活史中具有原生质团阶段,故归类于原生界、根肿菌门、根肿菌纲、根肿菌属。核盘菌是一种常见的兼性寄生性真菌。上述两种病原菌的寄生过程均存在寄主与宿主之间关于糖分的竞争。本论文结合生物信息学手段和分子生物学实验技术,以白菜为研究对象,选定Br SWEET15为目标基因,探究其多拷贝成员在根肿病及菌核病发病过程中的功能,弄清Br SWEET15a、15b和15c在其抗病性形成过程中的分子机理。取得的研究结果如下:(1)芸薹根肿菌侵染后24h和48h的RNA-seq分析。以芸薹根肿菌孢子液侵染的方式对白菜ECD05材料进行根肿病发病实验,分别在侵染后24h和48h获得根部组织,进行转录组测序。有三个比较组:24h CKvs24h I、48h CKvs48h I和24h Ivs48h I,差异表达基因数量分别为4406个、1412个和1253个。KEGG通路的富集分析结果显示,三个比较组中均含有病原菌互作淀粉、蔗糖代谢和植物激素信号转导等富集水平显著的通路。GO分类中DEGs的主要terms有19个,富集趋势差异明显的有免疫系统进程、排毒途径、刺激响应、信号、生长、多生物进程和细胞死亡等。其中,刺激响应、排毒途径和生物粘着是三组共有的差异明显的terms。研究发现,根肿菌侵染后的24 h是寄主机体调节的最活跃时期。荧光定量PCR验证结果显示,34个Br SWEET中的22个家族成员的荧光定量结果和转录组测序的表达变化趋势一致。(2)Br SWEET15a是Br SWEET15的优势表达基因。根据RNA-Seq和qRT-PCR结果,选择Br SWEET15a、15b和15c作为目标基因进行深入研究。分别构建Br SWEET15a、15b和15c的亚细胞定位载体和启动子融合GUS表达载体,分析基因表达功能和启动子活性。另外,使用在线启动子分析软件Plant CARE对Br SWEET15a、15b和15c的三个启动子序列进行结构分析和功能预测。Br SWEET15a和Br SWEET15b被证实在细胞膜上表达与定位,它们的启动子中均具有CAAT-box和TATA-box等核心启动子元件。GUS染色的结果显示,Br SWEET15a启动子具有表达活性。因此,Br SWEET15a是Br SWEET15的优势表达基因。(3)Br SWEET15a的功能分析。构建Br SWEET15a异位表达载体和At SWEET15过表达载体,并进行拟南芥浸花转化。同时,对At SWEET15的TDNA插入突变体进行纯合检测后,对过表达转化株以及突变体纯合株进行根肿菌和核盘菌侵染后的表型观察,结果表明,在根肿菌侵染过程中,虽然过表达的Br SWEET15和At SWEET15与对照组病情差异不明显,但T-DNA插入的拟南芥植株表现出相较于野生型植株更强的感病性。所以,在根肿菌侵染过程中,SWEET15表现为抗性基因。在核盘菌侵染过程中,过表达的Br SWEET15与对照组发病情况没有显著差异,而T-DNA插入的拟南芥植株表现为比野生型拟南芥更加抗病。由此可见,在核盘菌侵染过程中,SWEET15表现为感病基因。因此,根肿菌和核盘菌对植物的侵染过程与分子机制有显著的差异。
其他文献
随着西方多元思潮的渗透趋势加强,中国特色思想政治教育也加快了脚步,然而实践中教育主体比较单一、教育方式偏显性化、思想政治教育地位弱化等问题引起学术界和政府管理层重视。新公共管理理论的主体多元化有利于克服思想政治教育主体单一的局限性,其市场化竞争的服务准则有利于思想政治教育方式方法的创新,其绩效监督和评估机制可以为教育效率与质量的提高建立回馈机制和遵循标准。从新公共管理视角为思想政治教育提供的改革策
新经济时代下国民生活水平不断提升,对公共管理工作提出更高的要求。为推动公共管理体系进一步发展,应重视构建公共管理,做好研究分析工作,实现推进服务型政府建设的目的。鉴于此,以新经济时代为着手点,分析公共管理特点及现状,探讨如何提高公共管理质量与效率,旨在为相关研究提供借鉴。
现代社会的快节奏伴随着各种创伤多发,各种耐药菌的出现,使作为创伤局部治疗手段的新型医用敷料的研发工作成为热点。本课题以改性明胶、温敏材料N-异丙基丙烯酰胺以及抗菌药物莫匹罗星为主要实验材料,制备莫匹罗星温敏水凝胶敷料并研究其性能。(1)首先将明胶改性成酰化明胶,然后制备成五种质量比例不同的温敏水凝胶敷料,并利用扫描电子显微镜和傅立叶红外光谱表征了该水凝胶敷料的结构及表面形态,当酰化明胶与N-异丙基
本文以‘白沙’和‘洛阳青’两种枇杷果实为实验材料,研究了不同温度、不同包装、气调处理以及ClO2和生物防腐剂对枇杷果实采后腐烂控制的效应,并进行了枇杷防机械伤包装与冷链物流示范试验。主要研究结果如下:1.研究了不同贮藏温度对‘白沙’和‘洛阳青’两个枇杷品种果实腐烂率和品质指标的影响,发现0℃和5℃的低温环境中枇杷果实的腐烂率比10℃、15℃和20℃的低,且具有较低的失重率。0℃与5℃相比,0℃的果
在漫长的驯化选择过程中,十字花科芸薹属芸薹种形成了一系列具有不同形态的变种,如白菜、大白菜、菜心、芜菁等,其中,芜菁膨大的肉质直根是芸薹种十分重要的农艺性状之一,是研究植物贮藏器官形成的一个典型的模型。此外,芜菁还具有很高的经济、营养和药用价值,因此了解芜菁肉质直根发育和形成的分子机制对加速芜菁产量、品质和营养价值的遗传改良至关重要。本研究以芜菁‘温州盘菜’(Wenzhoupancai,WZPC)
芜菁作为西藏少数能够成为高原特色产业的重要经济作物之一,是西藏地区一种传统的药用、食用和饲用作物,其栽培历史悠久,分化类型多样。由于青藏高原特殊的地理环境条件使得西藏芜菁地方品种丰富,具有较高的遗传多样性。然而,近年来由于自治区全面启动国家生态保护工程,随着整体搬迁聚居以及城镇化进程的显著加快,现代农业生产方式和农牧民的生活方式发生了巨大的改变。虽然芜菁种植面积有所扩大,但目前藏区广大农牧民已在一
在我国柑橘上有两种显然不同的链格孢菌病害,即柑橘黑腐病(Alternaria black rot,ABR)和褐斑病(Alternaria brown spot,ABS)。前者主要引起成熟后贮运期果实的腐烂,后者则引起生长期的落叶、枯梢和落果。虽然病害不同,但褐斑病菌和黑腐病菌在形态学上很难区分,以致对两者的分类地位和学名使用上存在较多的争议。近些年链格孢属真菌的分类有了长足的进展,对种的界定有了比
新公共管理诞生于80年代中后期,在英美等西方发达国家兴起,新公共管理建立在对传统公共行政的批判。该理论主张将市场的竞争机制和私营部门的管理方式引入到公共部门中,或者说是引入到政府中,新公共管理得到了许多国家的认可,被许多国家运用到政府管理中。同时,新公共管理也存在许多缺陷,如管理主义,经纪人假设,等等,本文对其历史背景,产生原因以及理论基础进行简要的概述,探析其存在的一些不足。
由镰刀菌复合种(Fusarium complex)引起的赤霉病,是影响我国小麦高产稳产的主要病害之一。该病害不仅会造成小麦严重减产,病原菌还会产生多种真菌毒素污染籽粒,危害人畜健康。解析赤霉病菌致病成灾机制,研发新的防控策略,对保障小麦的生产安全和食品安全具有重要意义。在小麦赤霉病流行过程中,病菌形成的子囊壳是其越冬的主要形态,子囊壳成熟后释放的子囊孢子是病害的主要初侵染源。因此,明确赤霉病菌有性