论文部分内容阅读
目的心房颤动(Atrial Fibrillation, AF)是临床上最常见的心律失常之一,大多数见于器质性心脏病,目前认为心房结构重构、心肌纤维化可能是房颤发生、维持的重要病理生理机制。p53基因是一种重要的抑癌基因,它在细胞凋亡的调控中有重要作用。p53在正常细胞中表达量极低,但当细胞受到低氧、紫外照射等应激后表达急剧增加并被激活,p53基因及其相关蛋白与心血管疾病心肌细胞凋亡有关,而其对房颤心房重构、心肌纤维化的作用却鲜有报道。本课题应用实时荧光定量(FQ-PCR)的方法研究凋亡因子p53mRNA、心肌纤维化指标Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA在风湿性心脏病房颤患者心肌组织中的表达。应用ELISE方法检测血清中心肌纤维化指标PⅠCP、PⅢNP。并进行相关分析研究几者的关系。同时行心肌组织切片来观察心肌纤维化的程度。此研究的目的在于探讨p53mRNA与风湿性心脏病房颤患者心房结构重构、心肌纤维化的分子机制。方法60例风湿性心脏病接受换瓣手术患者分为两组,其中窦性心律组(SR)30例,房颤组(AF)30例。于术中获取右心耳组织约100mg,取外周抗凝血2ml及非抗凝血2ml。提取心肌组织总RNA,反转录成cDNA,根据p53、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA基因引物序列,采用实时荧光定量(FQ-PCR)方法检测心肌组织中p53、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA的表达,并对其进行相关性分析,采用ELISA方法检测上述60例患者血液标本血清中PⅠCP, pⅢNP的浓度,HE染色后行心肌组织的病理学检查。结果(1)与SR组比较,AF组左心房内径(LAD)明显扩大；(2)与SR组比较,AF组心肌组织中ColImRNA水平明显增加(t=2.11,P<0.05)；AF组ColⅢmRNA表达虽有所增加,但无统计学意义(t=0.187,p>0.05)；(3)与SR相比,AF患者血清PⅠ CP、PⅢNP含量明显增加(t=3.491,P<0.01：t=2.695,P<0.05)：(4)各组的病理切片提示：SR组心肌间质中仅见少量胶原纤维；AF组可见心肌间质中纤维组织增生,心肌肌束被大量条索状胶原纤维分隔。(5)心肌组织中ColⅠ mRNA.血清中P I CP.PⅢNP含量与左房内径间呈显著的正相关关系(r=0.735,P<0.01； r:=0.798,P<0.01； r=0.615,P<0.05)；且ColImRNA与PⅠ CP成正相关(r=0.698,P<0.05)；ColⅢ mRNA与左房内径、PⅢNP无相关性(r=0.087,P>0.05； r=0.486,P>0.05)。(6)与SR组比较,AF组心肌组织中p53mRNA水平明显增加(t=4.87,P<0.01);(7)经相关性分析得出AF患者心肌组织中p53mRNA水平与左房内径、心肌组织中ColⅠ mRNA.血清中PⅠ CP、PⅢNP呈显著的正相关关系(r=0.776,P<0.01； r=0.765,P<0.01； r=0.798,P<0.01； r=0.615,P<0.05；)；与ColⅢ mRNA无相关性(r=0.159,P>0.05)。结论p53可能是参与房颤心房结构重构、心肌纤维化的分子机制之一,可能与房颤的发生和维持有关。