论文部分内容阅读
目的:牙周炎是发生在牙龈、牙周膜、牙槽骨的慢性破坏性疾病。牙菌斑生物膜是借助生物膜附着在一起的细菌群体,是慢性牙周炎发生的直接原因。细菌通过分泌内毒素等感染物质直接破坏牙周组织或刺激宿主免疫系统间接致使牙周炎发生。宿主自身免疫对炎症的反应影响牙周炎发展[1],受到刺激后T淋巴细胞会分化成不同的亚型:Th1、Th2、Th17、Treg等,这些细胞及其相关细胞因子影响着牙周炎的发展与转归。白介素17(interleukin 17,IL-17)是一种主要由Th17细胞分泌的促炎因子[2],在牙周炎症过程中可破坏中性粒细胞的稳态,促使其向炎症部位聚集,并作用于破骨细胞促进牙槽骨吸收[3]。转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)是Treg等细胞产生、维持功能的重要细胞因子,是一种多效能细胞活性调节因子,同时发挥抗炎和促炎双重作用,能够作用于机体免疫应答、炎症反应、组织修复及胚胎发育等多方面。研究发现TGF-β参与牙周炎症发展过程[4]。吸烟是促进牙周病发生和发展的重要危险因素,影响着牙周病治疗效果。那么吸烟对慢性牙周炎的作用中是否包括影响龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)中IL-17和TGF-β的表达水平呢,通过本实验来对这一问题进行探讨。方法:1病例选择1.1一般材料:根据患者的吸烟情况将于2018年5月-12月在河北医科大学口腔医院牙周一科就诊的中重度慢性牙周炎患者27例分成两组:非吸烟组(Non-smoking periodontitis,NP组)12例,吸烟组(Smoking periodontitis,SP组)15例,性别均为男性,年龄30至56岁之间,吸烟组平均年龄为46.2岁,非吸烟组平均年龄为49.3岁。1.2纳入标准:汉族;成人;患有慢性牙周炎;口内至少有20颗功能牙;无糖尿病、高血压、凝血功能障碍疾病、神经系统疾病、类风湿病等系统性疾病史;治疗前3个月内未服用过抗生素、非甾体抗炎药、免疫调节剂等;一年内未接受过系统牙周治疗,无明显错牙合畸形。2实验方法2.1记录一般情况:姓名、健康状况、用药史、吸烟状况、牙周治疗史、联系方式、首次就诊日期等。2.2检查全口牙周情况,填写牙周情况表。牙周检查包括:探诊深度(probing depth,PD)、附着丧失(attachment loss,AL)、出血指数(bleeding index,BI)、松动度、根分叉病变,同时拍摄曲面断层片来辅助诊断。2.3选择有牙周病变的磨牙或第二前磨牙采取龈沟液,所选牙齿无龋坏、牙髓及根尖病变、咬合创伤。将6根30号吸潮纸尖剪去尖端5mm,置于Ep管中称重,高温高压消毒。龈上洁治前采集患者龈沟液,取样时去除待测牙牙面上菌斑及大块龈上牙石,将吸潮纸尖置于待测牙颊舌侧牙周袋近中、中央、远中,30s后取出,取样后将吸潮纸尖置于原Ep管中称重,两次测量的差值即龈沟液的重量,按1 g/m L换算成体积。EP管置于-80度低温冰箱保存待用。2.4对患者进行全口龈上洁治,龈下刮治及根面平整(分上下颌两次行龈下刮治)。3%过氧化氢溶液冲洗,于牙周袋内上碘酚、碘甘油。2.5给予患者口腔卫生指导,教授患者正确的刷牙方法及牙线、牙间隙刷的使用,并劝导吸烟患者减少吸烟量或戒烟。2.6龈下刮治完成后4周复诊,用相同方法在同一颗牙齿颊舌侧牙周袋的近中、中央、远中采集龈沟液,并检查PD、AL等指标。在取样前和取样后将装有吸潮纸尖的EP管称重记录,前后两次的差值即为龈沟液重量,按1g/ml换算成体积。EP管储存于低温冰箱中待用。2.7洗提龈沟液及细胞因子的检测:EP管中加150μl PBS缓冲液,震荡、离心2000r/min×10min,取上清液。采用双抗体夹心ELISA法对GCF中IL-17和TGF-β浓度进行检测。用统计学软件分析得到的数据。结果:1临床指标1.1探诊深度牙周基础治疗前探诊深度:非吸烟组6.00±1.20mm,吸烟组5.93±1.16mm。非吸烟组与吸烟组差异无明显统计学意义(P>0.05)。牙周基础治疗后探诊深度:非吸烟组3.58±0.79mm,吸烟组4.53±1.06mm。非吸烟组低于吸烟组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后吸烟组和非吸烟组探诊深度均较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。基础治疗前后非吸烟组和吸烟组探诊深度都得到改善,非吸烟组下降值(2.41±0.67)高于吸烟组(1.40±0.73),差异有统计学意义(P<0.05)。1.2附着丧失牙周基础治疗前附着丧失:非吸烟组4.83±1.26mm,吸烟组4.66±1.34mm,差异无明显统计学意义(P>0.05)。牙周基础治疗后附着丧失:非吸烟组4.58±1.24mm,吸烟组4.46±1.12mm。治疗前后,吸烟组和非吸烟组附着丧失略降低,差异无明显统计学意义(P>0.05)。2龈沟液中IL-17与TGF-β水平2.1龈沟液中IL-17的水平牙周基础治疗前龈沟液中IL-17浓度:非吸烟组66.78±24.47ng/ml,吸烟组100.34±35.28ng/ml。非吸烟组低于吸烟组,差异有统计学意义(P<0.05)。牙周基础治疗后龈沟液中IL-17浓度:非吸烟组30.97±11.81ng/ml,吸烟组79.32±30.72ng/ml。非吸烟组低于吸烟组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,吸烟组和非吸烟组IL-17的浓度均较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。基础治疗前后龈沟液中IL-17浓度下降值非吸烟组(35.80±18.52)高于吸烟组(21.01±10.18),差异有统计学意义(P<0.05)。2.2龈沟液中TGF-β的水平牙周基础治疗前龈沟液中TGF-β浓度:非吸烟组288.90±51.36ng/ml,吸烟组352.87±38.15ng/ml。非吸烟组低于吸烟组,差异有统计学意义(P<0.05)。牙周基础治疗后龈沟液中TGF-β浓度:非吸烟组176.46±49.61ng/ml,吸烟组270.67±52.21ng/ml。非吸烟组低于吸烟组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,吸烟组和非吸烟组TGF-β的浓度均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。基础治疗前后龈沟液中TGF-β浓度的下降值非吸烟组(112.44±42.12)高于吸烟组(82.21±25.31),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.吸烟组IL-17和TGF-β的浓度在治疗前后均高于非吸烟组,提示吸烟加重牙周炎症反应。2.牙周基础治疗可有效改善牙周组织的炎症状态,降低牙周探诊深度、IL-17、TGF-β的浓度。3.吸烟组治疗前后探诊深度、IL-17和TGF-β浓度下降值均低于非吸烟组,提示吸烟影响牙周基础治疗效果。