【摘 要】
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目的:WEE1是调节G2/M细胞周期检查点的酪氨酸激酶,对肿瘤的发生发展机制起到重要作用,而且在多种肿瘤都存在WEE1的高表达。MK-1775作为高亲和力的靶向WEE1的小分子抑制剂,在
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目的:WEE1是调节G2/M细胞周期检查点的酪氨酸激酶,对肿瘤的发生发展机制起到重要作用,而且在多种肿瘤都存在WEE1的高表达。MK-1775作为高亲和力的靶向WEE1的小分子抑制剂,在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的抗肿瘤效果和机制尚未报道。本论文旨在探究MK-1775靶向抑制WEE1对LSCC的抑癌作用和机制。方法:1、利用MTT法、流式细胞术分别检测LSCC细胞增殖、细胞周期分布及细胞凋亡的情况。2、采用DHE染色法和NAC处理法分别检测细胞内活性氧(ROS)水平。3、运用蛋白质印迹法检测细胞周期及凋亡相关蛋白的表达水平。4、通过裸鼠移植瘤实验,探究WEE1抑制剂MK-1775在体内抗LSCC作用。结果:1、WEE1小分子抑制剂MK-1775在体外抑制LSCC细胞的生长,且IC50值与WEE1蛋白表达量负相关。2、MK-1775诱导LSCC细胞发生G2/M期阻滞和细胞凋亡。3、MK-1775诱导LSCC细胞内ROS水平上升。4、NAC能部分逆转MK-1775诱导的ROS产生和细胞凋亡。5、MK-1775抑制裸鼠体内KB-3-1移植瘤的生长。结论:WEE1抑制剂MK-1775在体内和体外均能抑制LSCC细胞的生长。
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