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随着养猪业的快速发展,规模化程度不断提高,在提高了养殖效益的同时,疫病的多发也成为困扰养猪场的重要问题。及时确定引起疫病的病原,并采取有效的生物安全措施是规模化猪场疫病防控的主要工作,消毒是一项经常性和基础性的生物安全措施,选取有效的消毒剂和作用方式,是保证消毒效果的关键。本研究在某规模化猪场发生的一起仔猪腹泻病原的分离鉴定、疫情扑灭的基础上选取生产中常用的四种消毒剂,在实验条件下研究其对大肠埃希菌、志贺菌、链球菌、金黄色葡萄球菌和伪狂犬病病毒等猪场常见病原的杀灭作用。取得以下结果:1.在排除仔猪腹泻是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的基础上,从患病猪肝脏中分离获得一株革兰氏阴性细菌,经生化试验和16s rRNA基因序列分析,确定其为大肠埃希菌;分离菌对头孢类抗生素高度敏感,对氧氟沙星类抗菌药物中度敏感,对氨苄西林?链霉素?哌拉西林等药物不敏感;经对病猪用敏感药物治疗和环境消毒,本次疫情得以扑灭。2.分别选取戊二醛-癸甲溴铵、溴化二甲基二癸基烃铵、过硫酸氢钾和次氯酸钠为候选消毒剂,大肠埃希菌、志贺菌、金黄色葡萄球和链球菌为目标菌,研究不同条件下各种消毒剂的最佳使用方法。(1)有效中和剂的选择在中和剂对细菌无明显影响的前提下,确定各种消毒剂的中和剂分别为:戊二醛-癸甲溴铵(500 mg/L)的中和剂为吐温-80(3 000 mg/L)+甘氨酸(1000mg/L);溴化二甲基二癸基烃铵(250 mg/L)的中和剂为吐温-80(3000 mg/L)+卵磷脂(300 mg/L);过硫酸氢钾(2 500 mg/L)的中和剂为硫代硫酸钠(300 mg/L);次氯酸钠(275 mg/L)的中和剂为硫代硫酸钠(300 mg/L)。(2)对大肠埃希菌有效杀灭作用条件在无蛋白干扰物的条件下:戊二醛-癸甲溴铵(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(31.25 mg/L)、过硫酸氢钾(312.5 mg/L)、次氯酸钠(138 mg/L)对大肠埃希菌(1.57×107cfu)的完全杀灭条件为:37℃、25℃、4℃作用5 min。在有蛋白干扰物时:(1)有机物浓度为3%时:戊二醛-癸甲溴铵(250 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(62.5 mg/L)、过硫酸氢钾(312.5 mg/L),次氯酸钠(138 mg/L)对大肠埃希菌(1.57×107 cfu)的完全杀灭条件为:25℃作用10 min。(2)有机物浓度为25%时,戊二醛-癸甲溴铵(1000 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(125 mg/L)、过硫酸氢钾(625 mg/L)、次氯酸钠(690 mg/L)对大肠埃希菌(1.57×107 cfu)的完全杀灭条件为:25℃作用10 min。(3)对金黄色葡萄球菌的有效杀灭条件在无蛋白干扰物的条件下:戊二醛-癸甲溴铵(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(31.25 mg/L)、过硫酸氢钾(312.5 mg/L)、次氯酸钠(138 mg/L)对金黄色葡萄球菌(2.15×107 cfu)的完全杀灭条件为:在37℃、25℃、4℃作用5 min。在有蛋白干扰物时:(1)有机物浓度为3%时:戊二醛-癸甲溴铵(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(125 mg/L)、过硫酸氢钾(1250 mg/L)、次氯酸钠(276 mg/L)对金黄色葡萄球菌(2.15×107)的完全杀灭条件为:在25℃作用10 min。(2)有机物浓度为25%时:戊二醛-癸甲溴铵(1250 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(250 mg/L)、过硫酸氢钾(2500 mg/L)、次氯酸钠(1104 mg/L)对金黄色葡萄球菌(2.15×107 cfu)的完全杀灭条件为:在25℃作用10 min。(4)对志贺菌的有效杀灭条件在无蛋白干扰物时:戊二醛-癸甲溴铵(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(31.25mg/L)、过硫酸氢钾(312.5 mg/L)、次氯酸钠(138 mg/L)对志贺氏菌(1.24×107 cfu)的完全杀灭条件为:在37℃、25℃、4℃作用5 min。(5)对链球菌的有效杀灭条件在无蛋白干扰物的条件下:戊二醛-癸甲溴铵(125 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(31.25 mg/L)、过硫酸氢钾(6250 mg/L)、次氯酸钠(138 mg/L)对链球菌(1.2×107cfu)的完全杀灭条件为:在37℃、25℃、4℃作用5 min。3.戊二醛-癸甲溴铵对伪狂犬病病毒的有效杀灭条件戊二醛-癸甲溴铵(125 mg/L)有效中和剂为甘氨酸(3000 mg/L),此剂量消毒剂和中和剂均对PK15细胞生长无影响;对108.1TCID50的伪狂犬病病毒最佳杀灭条件为25℃作用30 min。在对猪场环境进行消毒杀灭病原时,四种消毒剂使用推荐作用条件为:戊二醛-癸甲溴铵(1250 mg/L)、溴化二甲基二癸基烃铵(250 mg/L)、过硫酸氢钾(2500 mg/L、)次氯酸钠(1104 mg/L),室温条件下(25℃),作用不少于10 min。