手足口病是一种由肠道病毒感染所引起的婴幼儿疾病，是我国法定报告的丙类传染病。绝大多数的患儿临床症状较轻，但少数患儿还可能会引发神经及呼吸系统的并发症，甚至导致死亡。研究表明，近几十年，引起亚太地区大面积爆发的手足口疾病的主要病原体为肠道病毒71型(Enterovirus71，EV71)。目前，尚未研发出针对EV71病毒的预防治疗性药物。基于手足口疾病高致病性、低致死率的特点，研发针对EV71病毒的特异性治疗药物具有重要的意义。　　随着生命科学技术的发展，单克隆抗体技术迅速在生命科学研究和医学临床检测诊断等各个领域得到广泛的应用。目前，基因工程抗体在疾病的预防、诊断及治疗方面得到了广泛的应用。本课题以单个B细胞抗体制备技术为实验基础，完善针对于EV71/VP1的人源单克隆抗体筛选技术平台，同时建立基于RACE-PCR的鼠源单克隆抗体筛选技术。　　本课题采用VP1抗原偶联纳米磁珠的方法进行手足口病患者B淋巴细胞分选，得到特异性B细胞。经稀释后分离单个B细胞，采用巢式PCR方法扩增单细胞抗体可变区基因，经测序鉴定后进行重轻链基因的真核表达载体构建。通过体外瞬时转染293 T/HEK293细胞得到重组抗体。结果，成功得到22株EV71/VP1单克隆抗体，其中2株具有一定的中和活性。与此同时，本实验通过EV71病毒免疫小鼠，结合流式细胞分选技术，得到鼠源特异性B细胞。采用RACE-PCR技术进行鼠源单细胞抗体可变区基因扩增，经测序鉴定得到1对有效的抗体重轻链序列。结果，成功建立了基于RACE-PCR的鼠源单克隆抗体筛选技术平台。　　综上，本研究成功建立了EV71/VP1单克隆抗体筛选制备的技术平台，为研发针对手足口疾病的治疗性药物奠定实验基础。