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目的:运用卵白蛋白(OVA)致敏和激发的方法建立过敏性哮喘小鼠模型,观察芒果叶提取物—芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效作用,并进一步探讨芒果苷联合麻黄碱对Th1/Th2型细胞基因表达的影响。 方法:4~5周龄SPF级、健康BALB/c雌性小鼠110只,体重18±2g,按随机数字表法分为11组,分别为空白对照组,模型对照组,地塞米松阳性对照组(1.25mg·kg-1),芒果苷高剂量治疗组(400mg·kg-1),芒果苷低剂量治疗组(200mg·kg-1),麻黄碱高剂量组(100mg·kg-1),麻黄碱低剂量组(50mg·kg-1),芒果苷高剂量与麻黄碱高剂量联合治疗组(400mg·kg-1+100mg·kg-1),芒果苷低剂量与麻黄碱低剂量联合治疗组(200mg·kg-1+50mg·kg-1),芒果苷高剂量与麻黄碱低剂量联合治疗组(400mg·kg-1+50mg·kg-1),芒果苷低剂量与麻黄碱高剂量联合治疗组(200mg·kg-1+100mg·kg-1),每组10只。采用OVA致敏和激发构建小鼠哮喘模型。 1、芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究:用小鼠自主活动记录仪,连续考察14天在给药1小时后小鼠的自主活动变化;观察激发时各组小鼠哮喘发作表现;细胞涂片进行外周血中白细胞分类计数;HE染色观察肺组织病理切片炎症细胞浸润情况;采用EIA法检测小鼠血清中OVA特异性IgE(OVA-sIgE)和ELISA法检测小鼠血清中cAMP的含量。 2、芒果苷联合麻黄碱对Th1/Th2型细胞因子mRNA表达水平的影响研究:采用RT-PCR法检测小鼠肺组织中Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4、IL-5、的mRNA表达水平。 3、采用SPSS17.0统计软件进行分析,Homogeneity检验方差齐性。 结果:1、芒果苷联合麻黄碱治疗过敏性哮喘的药效学研究:各联合给药组与麻高组相比,可明显降低小鼠的自主活动力(P<0.01);与模型组、芒高组、芒低组、麻低组比较,联合给药组可明显减轻小鼠哮喘发作表现如呛咳、呼吸急促、躁动不安、腹肌收缩、紫绀等症状(P<0.01);与模型组、麻低组比较,联合给药组能明显减少全血中嗜酸性粒细胞(EOS)比例(P<0.01);与模型组、芒低组比较,联合给药组可显著升高全血中单核细胞的比例(P<0.01);与模型组、麻低组相比,芒高+麻高、芒高+麻低、芒低+麻高组可显著降低全血中中性粒细胞的比例(P<0.01);与模型组相比,芒高+麻高、芒高+麻低组可降低全血中的白细胞总数(P<0.05~0.01)。与模型组、芒低组、麻低组比较,联合给药组均可不同程度的改善肺组织的病理学改变,减轻气道炎症(P<0.05~0.01);与模型组、芒低组、麻低组比较,联合给药组均可显著降低血清中OVA-sIgE含量(P<0.01);与模型组、芒低组、麻低组比较,芒高+麻高组、芒低+麻低组均可显著升高血清中cAMP含量(P<0.01)。 2、芒果苷对Th1/Th2型细胞因子mRNA表达的影响:RT-PCR结果显示:芒低+麻高组显著降低Th2型细胞因子IL-4 mRNA表达水平(P<0.05);联合给药组可降低Th2型细胞因子IL-5 mRNA表达水平,但与模型组相比,无显著性差异;芒高+麻高组、芒低+麻高组可显著上调Th1型细胞因子IFN-γmRNA表达水平(P<0.01)。 结论:1、芒果苷与麻黄碱联合用药可明显降低麻黄碱所致小鼠亢奋、震颤等副作用;可明显减轻在激发时哮喘小鼠发作表现、哮喘小鼠体内EOS浸润及OVA-sIgE含量、升高cAMP含量。改善肺组织病理学改变,减轻气道炎症,显示芒果苷与麻黄碱联合用药对治疗哮喘有显著的药效作用。 2、联合给药组可调节Th1/Th2型细胞因子mRNA表达,提示联合给药组治疗过敏性哮喘的免疫分子机制可能是调节 Th1/Th2型细胞因子mRNA表达。