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枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)是原产我国的亚热带冷敏水果,属非跃变型果实,根据果肉颜色可以分为白肉枇杷和红肉枇杷两大类。红肉枇杷果实在采后冷藏过程中易发生果肉木质化现象,表现为果肉硬度上升和木质素积累,严重影响果实商品性。本论文研究了EjAP2-J1、EjHSF3及其相关转录复合体参与枇杷果实冷害木质化调控的生物学机制,为枇杷采后贮藏及木质化调控提供了理论依据。主要结果如下：1.筛选获得枇杷冷害木质化相关的AP2/ERF基因家族成员。利用枇杷RNA-Seq数据库,克隆得到18个AP2/ERF基因,其基因表达对低温响应各异,其中EjERF8和EjERFl6(激活型AP2/ER F)的表达受程序性降温(LTC)处理抑制,与果肉木质化呈正相关关系；EjERF7和EjAP2-1(抑制型AP2/ERF)的表达受LTC处理诱导,与果肉木质化呈负相关关系。进一步利用双荧光素酶体系,明确仅EjAP2-1可转录抑制木质素合成结构基因Ej4CL1启动子活性,表明EjAP2-1可能负调控枇杷冷害木质化。2.解析了EjAP2-1转录调控枇杷果实木质化的生物学机制。酵母双杂(Y2H)和双分子荧光互补(BiFC)实验结果显示和EjAP2-1存在蛋白互作,EjMYB1/2且双荧光素酶实验结果表明EjAP2-1与EjMYB1/2存在协同转录调控效应,即EjAP2-J1抑制EjMYB1对木质素合成的激活效应,并可增强EjMYB2的抑制效应。进一步利用基因定点突变技术,将EjAP2-1的2个EAR结构域进行突变,结果表明,mEjAP2-1丧失与(mEjAP2-1)的转录协同效应,但EAREjMYB1/2突变并不影响mEjAP2-1与的蛋白互作。因此,EjAP2-1参与枇杷果EjMYB1/2实冷害木质化可能是通过与蛋白互作实现,EAR是EjAP2-1抑制功EjMYB1/2效的源头,而则行使抑制信号传递功能。EjMYB1/23.明确了EjHSF3协同EjAP2-J参与调控枇杷果实木质化的生物学机制。利用枇杷RNA-Seq数据库,分离得到了8个热激蛋白基因(EjHsp70-1/2、EjsHsp1/2/3/4/5/6)和3个热响应因子(EjHSF1、EjHSF2和EjHSF3)。研究结果表明,EjHsp与EjHSF1具有协同表达模式,并响应热激处理(HT),同时EjHSF1能转录调控EjHsp的启动子。推测HT处理通过激活EjHSF1,进而转录调控EjHsp,诱导提高枇杷抗冷性,即EjHSF1-EjHsp-抗冷性通路。EjHSF3不响应HT,但受LTC处理抑制,并能正向调控木质素合成结构基因Ej4CL1启动子的活性。同时,EjHSF3能与EjAP2-1发生蛋白互作,进而协同调控枇杷果实木质化。综上所述,本文研究发现了两个参与调控枇杷果实冷害木质化的新型转录因子,即EjAP2-1(?)EjHSF3,两者参与果实冷害木质化的机制各不相同,同时两者也存在蛋白-蛋白互作的关系。上述结果进一步丰富了枇杷果实冷害木质化调控的分子生物学机制。