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目的检测Wnt3a/β-catenin信号通路中膜蛋白Wnt3a和核心信号蛋白分子β-catenin在狼疮性肾炎模型小鼠(MRL/lpr小鼠)肾脏组织中的表达水平,探讨Wnt3a/β-catenin信号通路是否参与狼疮性肾炎的发生发展,并为狼疮肾炎的分子生物学机制研究提供理论依据。方法1.动物的饲养及分组购买6周龄雌性MRL/lpr小鼠和C57BL/6小鼠各15只,前者作为模型组,后者作为正常对照组,两组小鼠饲养至16周龄后,先用代谢笼法收集小鼠24小时尿,并在麻醉下,摘眼取血和留取肾脏组织。2.狼疮肾炎的一般生化学检测留取小鼠血清,用酶联免疫吸附法分别测定两组小鼠血清中抗核抗体(ANA)和抗双链DNA抗体(ds DNA)水平。应用全自动生化分析仪测定两组小鼠24尿蛋白。3.狼疮肾炎模型的病理学检测取肾脏组织行HE染色、PASM染色、Masson染色,观察两组小鼠肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察两组小鼠肾脏组织中免疫复合物Ig G和补体C3的沉积。4.狼疮小鼠肾脏组织中Wnt3a和β-catenin基因的检测运用实时定量PCR技术测定模型鼠组和正常对照组小鼠肾脏组织中Wnt3a和β-catenin基因的表达情况。5.狼疮小鼠肾脏组织中Wnt3a和β-catenin蛋白的检测运用免疫蛋白印迹技术(WB)测定模型鼠组和正常对照组小鼠肾脏组织中Wnt3a和β-catenin蛋白的表达情况。结果1.狼疮肾炎模型小鼠的一般状态模型鼠组在饲养至16周龄时颈部出现红色皮疹、脱毛、结痂等表现,取材时发现模型鼠组较正常对照组脾脏肿大。2.狼疮肾炎的一般生化学检测与正常对照组相比,模型鼠组尿蛋白含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型鼠组血清中ANA及ds DNA水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.狼疮肾炎的病理学改变病理检测及免疫荧光结果提示模型鼠组肾脏组织中肾小球系膜细胞增生、炎症细胞浸润,肾小球中可见免疫复合物Ig G和补体C3沉积。4.实时定量PCR检测狼疮小鼠肾脏组织中Wnt3a和β-catenin基因的表达模型鼠组肾脏组织中Wnt3a(2.49±0.939)和β-catenin(1.53±0.110)基因表达较正常对照组Wnt3a(0.90±0.156)和β-catenin(0.82±0.109)基因表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.免疫蛋白印迹法(WB)检测狼疮小鼠肾脏组织中Wnt3a和β-catenin蛋白的表达模型鼠组肾脏组织中Wnt3a蛋白(0.46±0.193)的表达较正常对照组Wnt3a蛋白(0.16±0.057)表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型鼠组肾脏组织中β-catenin蛋白(1.59±0.471)的表达较正常对照组β-catenin蛋白(0.55±0.209)表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Wnt3a/β-catenin信号通路处于异常活化状态,异常活化的Wnt3a/β-catenin信号通路参与了狼疮肾炎的发生发展,Wnt3a/β-catenin信号通路的异常高表达可能是狼疮肾炎发病的分子生物学机制之一。