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由于长期应用激素带来的副作用,使得在本世纪初,国际国内对是否采用激素替代疗法(hormone replacement therapy, HRT)治疗围绝经期征侯群争议很大。针刺治疗该症在国内已取得满意疗效,但是在国内外仍不甚普及。原因在于针刺治疗生殖系统功能紊乱性疾病的机制研究较少。因此,应用现代医学的语言阐释针刺治病的科学内涵,是更好的推广针刺疗法的需要。我们以往观察到,切除卵巢大鼠给予一组特定穴位电针(electroacupuncture, EA)处理后,外周血雌二醇(estradiol, E2)水平明显升高;肾上腺功能明显活跃。为了更加深入的探讨血E2水平升高和肾上腺功能活跃的机制,本文通过观察大鼠下丘脑促皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)合成、表达和释放的改变以及电针对其的影响,探讨大鼠肾上腺功能活跃的中枢机制;观察电针对大鼠肾上腺雄激素合成的关键酶---17α-羟化酶/17,20-裂解酶,肝脏、脂肪组织以及脑内一些核团的芳香化酶表达的影响,探讨升高的血E2的来源,从而系统深入的阐明针刺调整大鼠HPOA功能的机制。实验动物分为:正常组(INT)、正常加电针组(INT+EA)、去卵巢组(OVX)、去卵巢加电针组(OVX+EA)、去卵巢长期饲养组(OVX-M)。电针组选用“关元”、“中极”、“子宫”和“三阴交”穴,于每天上午8:00-10:00给予电针,每天一次,每次30分钟,连续3天;波型为连续波,频率3Hz,刺激强度2mA。采用免疫组织化学、RT-PCR、Northern blot、Dot blot、脑核团推挽灌流、放射免疫分析等方法观察了大鼠脑内促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone, GnRH)和CRH合成、表达及释放的改变;免疫荧光双标-激光共聚焦技术观察了CRH和GnRH在脑内的共存;RT-PCR、Western blot、原位杂交组织化学等观察了组织芳香化酶和17α-羟化酶/17,20-裂解酶表达的改变;放射免疫分析法测定大鼠血E2、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropin hormone, ACTH)、睾酮(testosterone, T)的水平等。结果显示:1. 与OVX组比较,OVX+EA组大鼠外周血E2水平明显升高,阴道涂片重新出现成熟脱落上皮细胞;血LH水平降低;下丘脑GnRH神经元数目明显增多,棘型细胞比例增加,纤维膨体密度增加,下丘脑组织GnRHmRNA表达增高;垂体GnRH受体mRNA表达升高;视交叉上核-内侧视前区-基底下丘脑区组织芳香化酶mRNA和蛋白表达显著上调。表明电针在细胞和分子水平调节了GnRH的合成、分泌;增强了脑内芳香化反应,进而影响了GnRH神经网络的活性,提示电<WP=6>针有效调整了去卵巢大鼠HPOA的功能。2. 与OVX组比较,OVX+EA组大鼠下丘脑室旁核CRH神经元数目明显增多,下丘脑组织CRHmRNA表达增高;OVX组CRH的基础释放显著高于INT组,OVX+EA组在电针开始后10分钟,大鼠下丘脑室旁核CRH的释放有轻微增加,在电针结束后10分钟达到分泌的高峰,而且这种高水平释放持续到电针结束后40分钟;垂体CRH受体mRNA表达减少;在OVX+EA组大鼠下丘脑室旁核观察到GnRH与CRH免疫阳性物质的共表达。表明电针促进了去卵巢大鼠下丘脑CRH的合成与释放;并可能通过其受体影响垂体促肾上腺皮质激素细胞对CRH的敏感性,提示电针上调了去卵巢大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能;CRH在电针调整HPOA异常功能中可能是重要因子。3. OVX+EA组大鼠腹部皮下脂肪组织芳香化酶的mRNA和蛋白表达水平比INT组显著升高;肝脏组织其mRNA和蛋白表达水平比OVX组显著升高。OVX+EA组大鼠肾上腺皮质17α-羟化酶/17,20-裂解酶的表达较OVX组明显升高。表明电针上调了去卵巢大鼠肾上腺皮质雄激素合成关键酶---17α-羟化酶/17,20-裂解酶mRNA的表达;促进了其皮下脂肪、肝脏组织芳香化酶的表达,提示电针可能通过此次途径促进了雌激素的合成,使血E2水平升高。4. 去卵巢后4月组(OVX4M)血E2水平明显升高,去卵巢后6月组(OVX6M)几乎稳定在INT组水平的一半以上;去卵巢后5月组(OVX5M)/OVX6M组GnRH、CRH神经元数目、下丘脑组织GnRHmRNA、CRHmRNA表达均接近INT组水平;组织芳香化酶表达和肾上腺皮质17α-羟化酶/17,20-裂解酶的表达在OVX6M组几乎都接近INT水平,与OVX+EA组相比也无统计学差异。提示切除卵巢导致大鼠HPOA功能异常时,机体在整体、细胞和分子水平存在自然代偿机能,而电针可能明显促进了机体的自然代偿进程。总之,电针通过下丘脑CRH系统上调去卵巢大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能;促进去卵巢大鼠的性腺外芳香化作用,可有效调整去卵巢大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的异常功能;在整体、细胞和分子水平,去卵巢大鼠机体存在对HPOA功能的自然代偿机能,而电针可能促发了自然代偿能力的提早启动。