近年来,树突状细胞(dendritic cells,DCs)的体外培养技术逐渐成熟,体外大量培养有多种方法,原理也不尽相同,不同的研究目的对DCs 的数量和纯度要求不同,相应地也可选择不同的培养方法,总的来说,DCs 的体外培养技术仍较复杂且成本较高。而以DCs 为基础的免疫抗肿瘤治疗,无论是在动物实验还是临床实验中均已取得初步疗效,但仍存在一定问题,例如动物研究多采用肿瘤细胞株接种的方法建立动物模型,与自身生长的肿瘤在肿瘤的发生、发展等机理上存在较大不同,临床方面研究则因积累的例数还不多,以及DCs 的治疗剂量、致敏方法、回输途径、远期效果等方面还存有诸多争议。经检索,DCs 的回输途径研究较少,DCs 免疫治疗后肿瘤组织特性的变化及与远期疗效的关系的研究则未见报道。为探讨更经济方便的DCs 体外培养方法、最佳的DCs 回输途径、DCs免疫治疗后肿瘤组织特性的变化以及对远期疗效的影响等,我们开展了以下三个方面的研究。第一部分F344 大鼠树突状细胞的体外诱导扩增目的:探讨体外诱导、扩增、培养大鼠树突状细胞的更简便的方法。方法:取F344 大鼠四肢骨,将骨髓冲出,洗涤后,采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离出单个核细胞,接种于培养瓶中,加入rrGM-CSF、rrIL-4体外诱导扩增培养。采用流式细胞仪检测其较特异的表面标志,以显微镜进行形态学鉴定。结果:形态学可观察到大量形态典型的DCs,每只F344 大鼠可获得0.5×10~7～1.0×10~7个DCs。通过检测DCs 较特异的表面标志,DCs 纯度可达约70%,能满足一般实验要求。